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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌red重组老是得不到正确的转化子，求大神帮助！
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melisax

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌red重组老是得不到正确的转化子，求大神帮助！

做大肠杆菌敲除，之前用同一片段电过，都很正常，这次用之前已经敲掉一个基因的重组菌继续做敲除，怎么也敲不掉，验证转化子都是假阳性，已经确认片段胶回收过不可能有质粒干扰，转化的pkd46也是正确的！不知道是什么原因！求各位大神解释下求帮助！

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1楼 2013-05-16 19:17:31
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
和第一次敲除的残余片段重组了

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2楼2013-05-16 19:39:40
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melisax

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-05-16 19:39:40
和第一次敲除的残余片段重组了

同源臂不一样啊，而且之前也做过二次敲除，挺顺利的

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3楼2013-05-16 23:35:16
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
flt不是还在么，而且你loopout的时候一点残余都没有么。
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4楼2013-05-16 23:45:34
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