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jully111

新虫 (初入文坛)

[求助] western用组织匀浆液能否用生理盐水匀浆 已有1人参与

打算做肠系膜血管的两个指标,一个用elisa法,一个用WESTERN,能否用生理盐水加血管匀浆后用于做这两个实验,还是加蛋白裂解液匀浆?希望有经验的大侠相助,要是分着做实在太浪费标本了。
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-06-09 14:22:33
jully111: 金币+5, ★★★很有帮助, 感谢热心人 2014-06-09 14:58:57
首先看你提的什么蛋白,丰度高的话用生理盐水匀浆可能不会有大问题,但在匀完后要马上进行后续实验,样品基本不能放,蛋白易降解。你也可以在生理盐水中加点蛋白酶抑制剂比如PMSF一类的。如果用RIPA蛋白裂解液提的蛋白,可以放在-70保存一段时间。但用RIPA裂解液提的蛋白就不能用ELISA检测了,里面的去污剂对ELISA影响太大。
2楼2014-06-09 12:26:58
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