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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[求助] 急求解答，药代组织分布的困惑

三个剂量的血药浓度已经基本做完了，在这里要感谢很多虫友的帮忙，接下来想要做组织分布，有诸多问题没有解决，希望大家倾情相助，真心谢过
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话，选取几个点比较好？

2 组织分布至少要做哪几个脏器？可以直接把一个时间点的6只老鼠的同一脏器一起研磨取上清吗？

3 脏器要怎么制成匀浆？可以用研钵研磨吗？需要加多少的溶液（PBS或生理盐水）到时候怎么算浓度？

PS：样品是用ELISA方法来检测的

[ Last edited by 阿娇阿娇 on 2012-12-3 at 21:05 ]
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1楼 2012-12-03 20:38:02
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

richbird

捐助贵宾 (著名写手)

小木虫二手科学家

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+2, 清晰，谢谢 2012-12-04 21:41:41
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话，选取几个点比较好？
一般3个时间点就够了。建议至少做5个，这样你的各个组织都可以形成一个PK曲线。以后不管是申报，还是发表文章都很有利。
2 组织分布至少要做哪几个脏器？可以直接把一个时间点的6只老鼠的同一脏器一起研磨取上清吗？
心肝脾肺肾脑骨髓性腺常规要做，其他的根据情况，靶器官、毒性器官也要做。

3 脏器要怎么制成匀浆？可以用研钵研磨吗？需要加多少的溶液（PBS或生理盐水）到时候怎么算浓度？
组织剪碎，然后按照组织重量加入9份的甲醇水（1：1）。匀浆用匀浆机最好，速度快，省时省力。另外，方法学要对稳定性研究充分考察。测定浓度乘以10换算为组织浓度。

不建议将不同个体的组织混合后测定综合浓度。每个个体分别测定可以获得个体间变异的信息，有利于申报或者发表文章。
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阿娇阿娇
一步步实现自己的理想，永远不要停下脚步。
8楼2012-12-04 16:46:57
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wangyuanji

银虫 (小有名气)
★
PSA: 金币+1, 谢谢交流讨论 2012-12-04 21:42:09
引用回帖:
8楼: Originally posted by richbird at 2012-12-04 16:46:57
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话，选取几个点比较好？
一般3个时间点就够了。建议至少做5个，这样你的各个组织都可以形成一个PK曲线。以后不管是申报，还是发表文章都很 ...

你好！
关于你提到的：
3.组织剪碎，然后按照组织重量加入9份的甲醇水（1：1）。匀浆用匀浆机最好，速度快，省时省力。另外，方法学要对稳定性研究充分考察。测定浓度乘以10换算为组织浓度。
加入9份甲醇水，是要制成10%的匀浆，可是，如此稀的匀浆，可能对于检测方法的灵敏度要求较高，对于微量成分的检测可能会有问题。不知是否能够加入尽可能少的匀浆介质（生理盐水，PBS，或者甲醇水），以制成浓的匀浆液，以利于低浓度成分的检测呢？
关于测定浓度乘以10，换算为组织浓度，我不太能够理解，各组织中浓度的测定也是根据标准曲线，以各组织的空白匀浆进行的，方法学考察也是以空白匀浆进行的，最终测得的浓度为何要乘以10呢？
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心态比能力重要
9楼2012-12-04 21:37:50
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普通回帖

wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-12-04 09:25:22
用匀浆机制匀浆，取哪些组织看你的药了，没有什么规定
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2楼2012-12-04 08:12:14
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wm彼岸花 at 2012-12-04 08:12:14
用匀浆机制匀浆，取哪些组织看你的药了，没有什么规定

比如说，可以把一组老鼠（6只）的给药后 6h 时候的肾脏放在一起匀浆吗？
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3楼2012-12-04 10:21:39
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-05 12:30:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-12-04 10:21:39
比如说，可以把一组老鼠（6只）的给药后 6h 时候的肾脏放在一起匀浆吗？...

是的啊，把组织放在一块
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4楼2012-12-04 10:46:18
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wm彼岸花 at 2012-12-04 10:46:18
是的啊，把组织放在一块...

5楼2012-12-04 12:35:00
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yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
PSA: 金币+1, 学习啦 2012-12-04 21:40:15
选取几个取药点要看你的药物性质了，根据它在体内的代谢情况取点，如果不知道最好取密一点。
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阿娇阿娇
6楼2012-12-04 13:34:35
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by yumulin at 2012-12-04 13:34:35
选取几个取药点要看你的药物性质了，根据它在体内的代谢情况取点，如果不知道最好取密一点。

7楼2012-12-04 14:53:10
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by richbird at 2012-12-04 16:46:57
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话，选取几个点比较好？
一般3个时间点就够了。建议至少做5个，这样你的各个组织都可以形成一个PK曲线。以后不管是申报，还是发表文章都很 ...

10楼2012-12-05 10:02:18
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