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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[求助] 急求解答,药代组织分布的困惑

三个剂量的血药浓度已经基本做完了,在这里要感谢很多虫友的帮忙,接下来想要做组织分布,有诸多问题没有解决,希望大家倾情相助,真心谢过
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话,选取几个点比较好?

2 组织分布至少要做哪几个脏器?可以直接把一个时间点的6只老鼠的同一脏器一起研磨取上清吗?

3 脏器要怎么制成匀浆?可以用研钵研磨吗?需要加多少的溶液(PBS或生理盐水)到时候怎么算浓度?

PS:样品是用ELISA方法来检测的

[ Last edited by 阿娇阿娇 on 2012-12-3 at 21:05 ]
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richbird

捐助贵宾 (著名写手)

小木虫二手科学家

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+2, 清晰,谢谢 2012-12-04 21:41:41
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话,选取几个点比较好?
一般3个时间点就够了。建议至少做5个,这样你的各个组织都可以形成一个PK曲线。以后不管是申报,还是发表文章都很有利。
2 组织分布至少要做哪几个脏器?可以直接把一个时间点的6只老鼠的同一脏器一起研磨取上清吗?
心肝脾肺肾脑骨髓性腺常规要做,其他的根据情况,靶器官、毒性器官也要做。

3 脏器要怎么制成匀浆?可以用研钵研磨吗?需要加多少的溶液(PBS或生理盐水)到时候怎么算浓度?
组织剪碎,然后按照组织重量加入9份的甲醇水(1:1)。匀浆用匀浆机最好,速度快,省时省力。另外,方法学要对稳定性研究充分考察。测定浓度乘以10换算为组织浓度。

不建议将不同个体的组织混合后测定综合浓度。每个个体分别测定可以获得个体间变异的信息,有利于申报或者发表文章。

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一步步实现自己的理想,永远不要停下脚步。
8楼2012-12-04 16:46:57
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wangyuanji

银虫 (小有名气)


PSA: 金币+1, 谢谢交流讨论 2012-12-04 21:42:09
引用回帖:
8楼: Originally posted by richbird at 2012-12-04 16:46:57
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话,选取几个点比较好?
一般3个时间点就够了。建议至少做5个,这样你的各个组织都可以形成一个PK曲线。以后不管是申报,还是发表文章都很 ...

你好!
关于你提到的:
3.组织剪碎,然后按照组织重量加入9份的甲醇水(1:1)。匀浆用匀浆机最好,速度快,省时省力。另外,方法学要对稳定性研究充分考察。测定浓度乘以10换算为组织浓度。
加入9份甲醇水,是要制成10%的匀浆,可是,如此稀的匀浆,可能对于检测方法的灵敏度要求较高,对于微量成分的检测可能会有问题。不知是否能够加入尽可能少的匀浆介质(生理盐水,PBS,或者甲醇水),以制成浓的匀浆液,以利于低浓度成分的检测呢?
关于测定浓度乘以10,换算为组织浓度,我不太能够理解,各组织中浓度的测定也是根据标准曲线,以各组织的空白匀浆进行的,方法学考察也是以空白匀浆进行的,最终测得的浓度为何要乘以10呢?
心态比能力重要
9楼2012-12-04 21:37:50
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普通回帖

wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-12-04 09:25:22
用匀浆机制匀浆,取哪些组织看你的药了,没有什么规定
2楼2012-12-04 08:12:14
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wm彼岸花 at 2012-12-04 08:12:14
用匀浆机制匀浆,取哪些组织看你的药了,没有什么规定

比如说,可以把一组老鼠(6只)的给药后 6h 时候的肾脏放在一起匀浆吗?
3楼2012-12-04 10:21:39
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-05 12:30:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by 阿娇阿娇 at 2012-12-04 10:21:39
比如说,可以把一组老鼠(6只)的给药后 6h 时候的肾脏放在一起匀浆吗?...

是的啊,把组织放在一块
4楼2012-12-04 10:46:18
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wm彼岸花 at 2012-12-04 10:46:18
是的啊,把组织放在一块...

5楼2012-12-04 12:35:00
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yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+1, 学习啦 2012-12-04 21:40:15
选取几个取药点要看你的药物性质了,根据它在体内的代谢情况取点,如果不知道最好取密一点。

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6楼2012-12-04 13:34:35
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by yumulin at 2012-12-04 13:34:35
选取几个取药点要看你的药物性质了,根据它在体内的代谢情况取点,如果不知道最好取密一点。

7楼2012-12-04 14:53:10
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by richbird at 2012-12-04 16:46:57
1 测血药浓度时间点是15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,10h,12h   做组织分布的话,选取几个点比较好?
一般3个时间点就够了。建议至少做5个,这样你的各个组织都可以形成一个PK曲线。以后不管是申报,还是发表文章都很 ...

10楼2012-12-05 10:02:18
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