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提取肉中微生物基因组用什么方法好？用试剂盒的话，什么试剂盒好？ 已有2人参与
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| 提取肉中微生物基因组用什么方法好？用试剂盒的话，什么试剂盒好？ |
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xiaoamuchong
专家顾问 (职业作家)
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【答案】应助回帖
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匀浆法 10g碎肉样于80mL灭菌离心管中，加入30mL灭菌生理盐水，冰浴条件下用高速匀浆器6500r/min匀浆30s[10]，将肉样转移入灭菌锥形瓶中，继续加入60mL灭菌生理盐水，轻轻摇匀，静置5min。所得的混浊液200×g离心1min，取15mL上清液，12000 × g离心5min。 细菌DNA提取 采用细菌DNA提取试剂盒，方法稍作调整。上述离心所得沉淀，加入200μL Buffer S悬浮，加入20μL溶菌酶(50mg/mL)，混匀，37℃孵育1h，加入30μL蛋白酶K(20mg/mL)，混匀，55℃孵育2～3h，然后继续按试剂盒操作说明进行。提取的DNA溶于80μL的TE缓冲液，1.2%琼脂糖凝胶电泳检测后，－20℃冻存。 可参考：巢氏pcr---冷却猪肉不同前处理对细菌DNA提取及PCR_DGGE的影响 作者：江 芸 |
2楼2014-04-20 14:53:13
3楼2014-04-22 08:58:52
quiller2000
木虫 (著名写手)
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4楼2014-04-23 00:11:32