应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 菌液PCR出现奇怪现象，急求大神解释
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
151/2返回列表12下一页
查看: 2015  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

moshangchenx

金虫 (正式写手)

[求助] 菌液PCR出现奇怪现象，急求大神解释 已有4人参与

各位大虾，本人在做菌液PCR时出现了一种奇怪现象，在试管中摇菌菌液PCR结果正常，但将该管中的菌液扩大培养后，菌液PCR扩不出目的条带，出现了比目的条带小很多的带，急求大神指点！

菌液PCR出现奇怪现象，急求大神解释
无标题.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
科研无止境，我心成蹉跎
1楼 2014-06-04 16:44:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-05 08:44:56
moshangchenx: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-05 09:08:04
菌液PCR很容易出现假阳性，建议用其他方法验证，例如提取质粒后进行PCR验证，也可以用酶切进行验证
另外，扩大培养很有可能污染了
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
2楼2014-06-04 20:00:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-05 08:45:03
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-04 20:00:39
菌液PCR很容易出现假阳性，建议用其他方法验证，例如提取质粒后进行PCR验证，也可以用酶切进行验证
另外，扩大培养很有可能污染了

有可能是他操作不当，菌液PCR检测我们常做的，没有问题

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-04 20:07:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-05 08:45:09
moshangchenx: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-05 09:09:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-04 20:07:58
有可能是他操作不当，菌液PCR检测我们常做的，没有问题
...

3泳道扩增出来的结果的确有很大的问题。一般菌液PCR是可以扩增出目的条带的，只不过会含有很多杂带，但是特异的那一条带还是有的。不过也不能排除特殊情况，本实验室一般都是粗抽质粒电泳，然后用质粒进行PCR。楼主的扩大培养很有可能出现了污染。
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-06-04 20:25:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meng_xu

铜虫 (小有名气)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-05 08:45:19
还是小体系的提取质粒，然后转化，再加大培养体积，比较好
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-05 05:40:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-06-05 08:45:23
你的质粒有多大，貌似1、2是质粒，不是扩增产物
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-05 08:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-05 08:49:24
moshangchenx: 金币+1, ★有帮助 2014-06-05 09:10:14
估计污染了，最好再加一个不带质粒的菌做PCR,当做阴性对照，
赞一下 回复此楼
星陈代谢
7楼2014-06-05 08:46:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moshangchenx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-04 20:00:39
菌液PCR很容易出现假阳性，建议用其他方法验证，例如提取质粒后进行PCR验证，也可以用酶切进行验证
另外，扩大培养很有可能污染了

我已经重新转化了，觉得污染的可能性比较大，谢谢
赞一下 回复此楼
科研无止境，我心成蹉跎
8楼2014-06-05 09:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moshangchenx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-04 20:07:58
有可能是他操作不当，菌液PCR检测我们常做的，没有问题
...

菌液PCR我是第一次做，所以还是很担心的，呵呵
赞一下 回复此楼
科研无止境，我心成蹉跎
9楼2014-06-05 09:07:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moshangchenx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-04 20:25:15
3泳道扩增出来的结果的确有很大的问题。一般菌液PCR是可以扩增出目的条带的，只不过会含有很多杂带，但是特异的那一条带还是有的。不过也不能排除特殊情况，本实验室一般都是粗抽质粒电泳，然后用质粒进行PCR。楼主 ...

恩，污染的可能性比较大
赞一下 回复此楼
科研无止境，我心成蹉跎
10楼2014-06-05 09:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 moshangchenx 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600，349 +5 吃的不少 2026-03-30 5/250 2026-03-30 23:31 by 果果妈咪
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:48 by zhuangyan123
[考研] 一志愿郑大材料工程290求调剂 +11 Youth_ 2026-03-30 11/550 2026-03-30 21:01 by peike
[考研] 359求调剂 +5 王了个楠 2026-03-25 5/250 2026-03-30 19:36 by 源_2020
[考研] 327求调剂 +5 小卡不卡. 2026-03-29 5/250 2026-03-30 19:30 by Wang200018
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
[考研] 287求调剂 +14 land xuxu 2026-03-26 14/700 2026-03-30 18:38 by 544594351
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 085600，专业课化工原理，321分求调剂 +5 大馋小子 2026-03-28 5/250 2026-03-29 08:56 by qingfeng258
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 085600，材料与化工321分，求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 085600，材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭