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科研无止境，我心成蹉跎

1楼2014-06-04 16:44:19

moshangchenx

金虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-04 20:07:58
有可能是他操作不当，菌液PCR检测我们常做的，没有问题
...

菌液PCR我是第一次做，所以还是很担心的，呵呵

科研无止境，我心成蹉跎

9楼2014-06-05 09:07:20

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西门吹雪170

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-05 08:44:56
moshangchenx: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-05 09:08:04

菌液PCR很容易出现假阳性，建议用其他方法验证，例如提取质粒后进行PCR验证，也可以用酶切进行验证
另外，扩大培养很有可能污染了

植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良

2楼2014-06-04 20:00:39

Neo2000

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-04 20:00:39
菌液PCR很容易出现假阳性，建议用其他方法验证，例如提取质粒后进行PCR验证，也可以用酶切进行验证
另外，扩大培养很有可能污染了

有可能是他操作不当，菌液PCR检测我们常做的，没有问题

[ 发自小木虫客户端 ]

3楼2014-06-04 20:07:58

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-05 08:45:09
moshangchenx: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-05 09:09:58

引用回帖:

3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-04 20:07:58
有可能是他操作不当，菌液PCR检测我们常做的，没有问题
...

3泳道扩增出来的结果的确有很大的问题。一般菌液PCR是可以扩增出目的条带的，只不过会含有很多杂带，但是特异的那一条带还是有的。不过也不能排除特殊情况，本实验室一般都是粗抽质粒电泳，然后用质粒进行PCR。楼主的扩大培养很有可能出现了污染。

植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良

4楼2014-06-04 20:25:15