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中庸001金虫 (小有名气)
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ELISA结果分析 已有1人参与
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ELISA实验结果 0为对照 1没有任何物品 2、3、4管的抗原浓度依次递增，出现的结果如此乱，求大神分析  0IO$DQU2ACSY6$3]{66]LR4.jpg |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
中庸001: 金币+3, ★有帮助 2014-06-07 20:39:58
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中庸001: 金币+3, ★有帮助 2014-06-07 20:39:58
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标记HRP，底物不是TMB+过氧化物，如果是这个底物的话，单波长检测应该是450，双波长是450+630的，为什么你的会是492的？ 感觉你的实验设计本身就有点问题。整个实验，根据你的实验操作和我过往的经验，我认为是摸索合适的抗原包被浓度。为了这样的实验目的，我会包被不同抗原浓度梯度（0.1μg/mL~5μg/mL）的反应板，包被、封闭之后，就正式开始实验，然后把一抗稀释成两个（阴性和阳性）或多个（梯度稀释，加零浓度点）浓度，加到反应板里孵育，孵育完了就洗板，加酶标二抗，在孵育，这次孵育完了以后，洗板加显色液。 对于你这个结果，可以说这次试验是废了。虽然是不同抗原浓度，有不同的OD值，但阳性的OD值太低了，连0.1都不要，可能的原因有： 1、检测的波长不对； 2、抗原没有包被到反应板上； 3,、抗原跟一抗没反应； 4、一抗跟二抗没反应； 5、二抗没有标记酶；（可能性不大） 6、显色液的有问题：配制出问题了，或不是合适的显色液； 总的来说，这样的数据是没办法分析的，只能是重新做实验，看看是哪部分出问题了。 |
10楼2014-06-06 12:58:35
中庸001
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2楼2014-06-03 21:35:38
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中庸001
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4楼2014-06-05 08:57:24