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wsf19850816

银虫 (初入文坛)

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[求助] 请教竞争ELISA问题已有1人参与

我们在做针对特定蛋白A的单抗，已知蛋白A,B,C,D同源性很强，我们获得高亲和力的单抗细胞株1F3，在交叉反应中，我们发现，在同时接触ABCD，四种抗原的时候，抗体几乎不和BCD反应。交叉反应我们使用的是竞争ELISA。

但是我们在做ABCD蛋白的western blot时候，发现我们的单抗和BCD都有反应，且反应强烈。

我们随后用包被了ABCD抗原的ELISA直接检测单抗对这四种包被抗原的亲和力，发现，在同样的抗体稀释度下，单抗对四种抗原的亲和力没有明显差异。

这就是我们的问题，貌似单抗可同时识别四种抗原，但是当A与BCD同时存在的情况下，抗体只优先于A反应，从而是的抗体和BCD几乎不反应，我想咨询下张老师，有没有那种抗原抗体反应模型可以解释这种情况。
因为我们并不是从事基础免疫的工作，所以我们无法对此种情形作出合理解释。
抗原抗体反应定义为一种可逆反应，但是不知道是不是和我们遇到的问题有关系。

我不是免疫学出身，所以各位大侠，帮帮忙哦

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1楼 2014-05-30 23:11:27

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antibodyknow

铜虫 (初入文坛)

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专业: 抗体工程学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

“我们发现，在同时接触ABCD，四种抗原的时候，抗体几乎不和BCD反应”
你的这个结论是如何得到的？（如果可能，将具体实验设计贴出了，大家可以帮你分析一下）
我个人认为这个结论不太可靠。因为你的单独实验表明此单抗与四种蛋白的结合能力相当。

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