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叫我陈爷

新虫 (初入文坛)

[求助] BCA试剂盒显色问题 已有1人参与

一直在用BCA试剂盒,最近藻细胞前处理之后用蛋白试剂盒发现一个问题:37度孵育半小时之后不显色,要等到一个半小时才显色,有人知道为什么吗?
我怀疑:
1.以前破碎功率是300,最近破碎换成400W之后,破坏了蛋白的结构。但是如果结构破坏了,应该是不显色,为什么一个半小时之后又显色了呢。
2试剂盒有问题,但是标准品,半个小时之后是有颜色的。
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。
3楼2014-05-23 13:34:37
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楼兰云梦

新虫 (初入文坛)

去谷歌上查查吧

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-05-23 11:22:18
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叫我陈爷

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yipan at 2014-05-23 13:34:37
建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。

温度也是37度的,按照试剂盒上面写的
4楼2014-05-23 14:10:50
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叫我陈爷

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yipan at 2014-05-23 13:34:37
建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。

颜色是会越来越深的,这个是因为水分蒸发所致。但是正常来讲30分钟后应该是紫色的,过一段时间会越来越紫,但是我的样品半小时之后和空白的颜色差不多,没有紫色的迹象,过一个半小时才显示紫色,我就觉得很奇怪了。
5楼2014-05-23 14:17:35
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