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散仙孔乙己

新虫 (小有名气)

[求助] 福林酚法测蛋白质浓度 已有1人参与

我在做蛋白质标曲的时候,用的是0.5mg/ml的牛血清蛋白溶液,然后梯度稀释,选用500nm可见光,测出来的吸光度虽然具有线性性,但是吸光度貌似普遍偏小,就连浓度最高的0.5mg/ml蛋白溶液的吸光度值也是只有0.38左右。我找了很多原因,开始以为是A、B、C液没配好,然后重新配,结果依然是这样,后来又重新配BSA溶液,也是这种情况,我师姐也是这样测得,不过她做的最高吸光值有0.6多,感觉我和她做的除了人不同,其他都没有什么差别啊。。。求大神分析原因。。。PS:会不会加试剂乙后静置的时间太短,我静置了30min。
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nyqf_0707

新虫 (初入文坛)

我跟楼主一样的问题 请问楼主解决了么
5楼2017-01-12 20:51:22
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刚果红

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
散仙孔乙己: 金币+10, 有帮助 2014-07-19 09:22:13
我用的也是BSA,福林酚试剂,也是静置30分钟后测定吸光值但是我的是在650nm下测的,在0.05至0.4这个范围内线性还是挺好的
3楼2014-07-14 15:42:20
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刚果红

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不好意思,上面的0.05至0.4指的是BSA的浓度值单位是mg/mL
4楼2014-07-14 15:43:37
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