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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助关于GUS验证载体构建的一些问题！
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kismet.young

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于GUS验证载体构建的一些问题！ 已有2人参与

最近准备做一个GUS验证，已经拿到2000bp的启动子序列，现在对下一步的工作有些细节问题比较迷茫，请教一下大家！
1 载体和农杆菌的选择：我看好多文献上有用pBI121也有用pCAMBIA1301的，想问一下这两个载体哪个更适合用于拟南芥的转化，还有就是农杆菌的选择，哪种型号的农杆菌适合用于拟南芥的转化？
2 引物的设计：首先是下游引物需要包含5'UTR区吗？也就是我这一段序列是到ATG完还是别的什么地方？还有就是设计引物的时候需要考虑会不会读码框的问题？
谢谢大家~
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1楼 2014-05-18 10:18:33
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kismet.young(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-19 20:18:13
建议你用pCAMBIA1381Z，可以直接将启动子插在GUS 前面，建议带utr

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3楼2014-05-19 17:02:55
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

转化拟南芥是最容易的，一般农杆菌就好

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4楼2014-05-19 17:03:40
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我用过LBA4404，C58，听说我C58转化效率要高一点，不过知道的时候，已经用的是4404了。条件弄好，都是可以的。
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相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
5楼2014-05-19 20:48:01
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