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kismet.young

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于GUS验证载体构建的一些问题! 已有2人参与

最近准备做一个GUS验证,已经拿到2000bp的启动子序列,现在对下一步的工作有些细节问题比较迷茫,请教一下大家!
1 载体和农杆菌的选择:我看好多文献上有用pBI121也有用pCAMBIA1301的,想问一下这两个载体哪个更适合用于拟南芥的转化,还有就是农杆菌的选择,哪种型号的农杆菌适合用于拟南芥的转化?
2 引物的设计:首先是下游引物需要包含5'UTR区吗?也就是我这一段序列是到ATG完还是别的什么地方?还有就是设计引物的时候需要考虑会不会读码框的问题?
谢谢大家~
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kismet.young

新虫 (初入文坛)

大神们帮帮忙吧~
2楼2014-05-19 14:09:57
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Neo2000

木虫 (著名写手)

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感谢参与,应助指数 +1
kismet.young(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-19 20:18:13
建议你用pCAMBIA1381Z,可以直接将启动子插在GUS 前面,建议带utr

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-05-19 17:02:55
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

转化拟南芥是最容易的,一般农杆菌就好

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-05-19 17:03:40
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我用过LBA4404,C58,听说我C58转化效率要高一点,不过知道的时候,已经用的是4404了。条件弄好,都是可以的。
相信黎明不会失约,相信付出必有回报!
5楼2014-05-19 20:48:01
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