| 查看: 2027 | 回复: 13 | |||
[求助]
western blot 转膜问题!已有6人参与
|
|
一共上样上四个孔道，蛋白大小都是14KD左右，SDS-page的胶考染后都能看见条带，但是跑Western blot竟然有的没出来。。。。 我是恒压湿转，100v，电流一开始0.7A，结束时1.5A，转50min，是转膜有问题吗？请各位分析一下~~ 谢啦！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
投稿精细化工
已经有6人回复
-
博士读完未来一定会好吗
已经有36人回复
-
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？
已经有10人回复
-
导师想让我从独立一作变成了共一第一
已经有10人回复
-
博士申请都是内定的吗？
已经有9人回复
-
心脉受损
已经有8人回复
-
读博
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
170kDa膜蛋白MRP1跑WB遇到问题
已经有39人回复- 请教WB方面的一些小细节问题
已经有4人回复
- 求助琼脂糖电泳电流过低怎么解决？
已经有3人回复
- western转膜后 膜上一片空白 marker也没转上，而且转膜液比较热是什么原因？
已经有20人回复
- Western blot 有没有大仙做过Cleaved caspase-3(17kD),求操作经验啊！
已经有11人回复
- 琼脂糖凝胶电泳
已经有9人回复
- SDS-PAGE电泳遇到的问题
已经有26人回复
- 跑电泳的时候恒压和横流有什么区别？转膜的时候呢？
已经有6人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳的电流怎么设啊？
已经有13人回复
- 请教关于普通琼脂糖凝胶电泳时电泳参数设置的问题
已经有9人回复
sunrq516516
金虫 (小有名气)
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 1066.8
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 155
- 在线: 45.1小时
- 虫号: 2731470
- 注册: 2013-10-17
- 性别: MM
- 专业: 代谢性疾病药物药理
2楼2014-05-14 17:57:39
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16487
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 40
- 帖子: 14451
- 在线: 2170.1小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2014-05-15 09:52:07
，那应该多少呢。。。胶没有化，预染marker转的很清楚。。。。4楼2014-05-15 11:39:13
Rubisco580
金虫 (小有名气)
- BioEPI: 4
- 应助: 66 (初中生)
- 金币: 997.7
- 红花: 7
- 帖子: 264
- 在线: 48.5小时
- 虫号: 553802
- 注册: 2008-05-04
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
5楼2014-05-15 15:42:54
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16487
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 40
- 帖子: 14451
- 在线: 2170.1小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
6楼2014-05-15 16:24:25
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
你的转膜液配方是什么？7. TRANSFER BUFFER pH 8.3 a. Tris Base 3.03g 6.06g 9.09g 12.12g b. Glycine 14.4g 28.8g 43.2g 57.6g c. Methanol 200mL 400mL 600mL 800mL d. MilliQ final volume 1L 2L 3L 4L i. When made accurately, pH should be in the range of 8.1-8.4. DO NOT ADD ACID OR BASE TO ADJUST pH ii. Store at 4C can be reused 2-3x. Do not discard down sink, must be sent to EH and S chemical waste disposal 参考一下吧，做不出来 可以先做一个内参蛋白。 |
7楼2014-05-15 21:29:09
张力民1598
铜虫 (小有名气)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1160.7
- 红花: 2
- 帖子: 246
- 在线: 33.4小时
- 虫号: 664421
- 注册: 2008-11-29
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2014-05-17 22:32:06
9楼2014-05-18 12:50:01
10楼2014-05-22 15:45:35