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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western blot 转膜问题!
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A_there

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 转膜问题!已有6人参与

一共上样上四个孔道，蛋白大小都是14KD左右，SDS-page的胶考染后都能看见条带，但是跑Western blot竟然有的没出来。。。。
我是恒压湿转，100v，电流一开始0.7A，结束时1.5A，转50min，是转膜有问题吗？请各位分析一下~~
谢啦！！
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1楼2014-05-14 16:58:22
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A_there

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-15 09:52:07
逆天的电流，你的胶没有化掉吗？

我也觉得挺大的，那应该多少呢。。。胶没有化，预染marker转的很清楚。。。。
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4楼2014-05-15 11:39:13
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你拿丽春红染膜看看……以及我听说考染后是无法转膜的……你的意思应该不是考染后转膜的吧，啊= =？
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Permanent head Damage
2楼2014-05-14 17:57:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
逆天的电流，你的胶没有化掉吗？
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3楼2014-05-15 09:52:07
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我170KD的蛋白，300mA转1h。
楼主这电流太恐怖，14KD可能转过了。
话说内参做了吗？
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5楼2014-05-15 15:42:54
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