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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 反转录效率和什么有关？
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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 反转录效率和什么有关？已有2人参与

反转录效率和引物退火温度有关系吗？如果引物退火温度是56度，反转录是不是温度偏高比较好？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼2014-05-13 15:14:23
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-13 15:52:59
linsui1989: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-13 22:17:52
提高温度在反转录过程中一般是有利的，不仅仅是引物模板配对的问题，更多与模板的二级结构有关。但是提高问题一般而言都是一厢情愿，因为酶受不了。。。目前病毒反转录酶，常规的就是42度。改造的如SSRIII可以到55度。更高的。有一个不常用的Tth可以做反转，可以到70度。但是这个用得非常少。

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2楼2014-05-13 15:20:41
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
linsui1989: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-13 22:18:17
首先，你要获得质量上乘的RNA，然后，选择靠谱的反转录酶，后面的所谓效率问题都不是问题啦

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3楼2014-05-13 18:00:31
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