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kingluyi23

金虫 (职业作家)

[求助] 液相测溶出配的对照品峰面积明显偏小 已有5人参与

如题,,现用HPLC测一个药的溶出,对照品溶液完全是按照质量标准里面的方法配制(先乙腈溶解,再用溶出介质4.4醋酸盐缓冲液稀释至10ug/ml浓度);;;结果出来的峰面积才只有67; 而不用溶出介质稀释的对照溶液峰面积(也是10ug./ml)则有305 ;请问各位做分析的 达人们 帮我分析一下 ,问题可能出在哪里??该如何解决呢???
(在下之前一直是做制剂的,对于分析的液相溶出方法学实在是经验偏少,故来此求助)

[ Last edited by 1949stone on 2014-5-13 at 15:33 ]
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想要飘逸的人生,还得先脚踏实地
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kingluyi23

金虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by voyager88 at 2014-05-13 13:20:18
1.你是对照使用溶出介质稀释了,峰面积是67,而不用溶出介质稀释的是305,说明三点,第一你的样品可能在介质中析出,过滤时直接去掉了,第二,你的样品在溶出介质中不稳定,第三,你选择的滤膜、注射器是否对药物有 ...

多谢大神的回复!

1.我仔细肉眼观察 该对照溶液  确实是澄清的啊,看不到有微粒在里面,所以我认为应该是溶解得比较完全的了。   确实,我也怀疑是过滤的时候,主药被吸附了一部分走了,因为这个药是难溶性的,而且粒径比较小的。 溶出取样用的 滤膜吸附试验我做了好几次了,确实是有吸附的。

2. 但我用质量标准里的混合溶剂(乙腈:磷酸:水)溶解主药配对照峰面积是正常的啊,做了10次左右 峰面积都是305左右,很稳定啊。

3. 方法是质量标准里的,应该不会错,现在就是这个对照液的峰面积出现问题。
4. 这个操作问题 不好说,我再多做几次。

5.溶液溶度是11ug/ml
想要飘逸的人生,还得先脚踏实地
6楼2014-05-13 14:51:19
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的样品在酸里面稳定吗?是不是在酸中不稳定降解了。还有纯度折合了没有?
另外最好还是换一个人再重新配制一遍,也可能是样品配制过程中配得不对导致的,换个人有助于发现问题。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
2楼2014-05-13 12:49:42
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.你是对照使用溶出介质稀释了,峰面积是67,而不用溶出介质稀释的是305,说明三点,第一你的样品可能在介质中析出,过滤时直接去掉了,第二,你的样品在溶出介质中不稳定,第三,你选择的滤膜、注射器是否对药物有吸附,这种吸附在不同溶剂中不太一样
2.你的样品在紫外条件下发生红移,或者蓝移,峰面积不一致
3.你的方法是否经过严格验证?
4.你在稀释中是否存在操作误差,是否进行多次重复试验结果都是这样
5.你的单位是什么,峰面积这么小,是否高于液相的定量限,在如此小的峰面积下,定量往往不准
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
3楼2014-05-13 13:20:18
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taoweijian

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
操作问题吧!对照品是成盐对照品么?还是单纯物质,如果是新药,客户方法不一定对的,我们公司就经常遇见否定客户方法,还是国外大公司
4楼2014-05-13 13:56:34
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