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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 高效液相测定含量计算方法
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zuihuaying

银虫 (小有名气)

[求助] 高效液相测定含量计算方法

用高效液相测定中药中有效成分含量时的，怎样进行实验设计，高效液相测定含量时用外标一点法计算含量和紫外分光光度计测定大类成分(总黄酮)含量的标准曲线法计算总黄酮含量是二者的计算方法有什么差别，二者的误差有何不同及具体适用情况
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1楼2012-06-25 18:10:13
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
参考文献，确定色谱条件进行分析。
液相外标一点计算和紫外的一样，只是液相的A是峰面积，紫外的A是吸收度。不同的是符号代表的物理意义不同。
总黄酮测定时，只是特征显色，不同区分同类物，没有什么专属性；液相是分离分析方法，会出很多不同物质的峰，计算时只计算与对照品色谱图位置一致的那个峰，所以专属性高。
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天道酬勤！
2楼2012-06-25 19:55:27
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zuihuaying

银虫 (小有名气)
如果是液相测定药材含量时，使用外标一点法，用不同浓度对照品所做的标准曲线（工作曲线，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标），能否将供试品测的峰面积代入标准曲线计算其含量？这和公式（C对照品/C供试品=A对照品/A供试品)计算出来的结果是否一致，二者的区别是什么，误差哪个大些，计算时是用后者吗？
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3楼2012-06-26 00:16:55
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zuihuaying

银虫 (小有名气)
非常感谢你的回答，我还想请教几个关于液相含量测定计算方法的问题，
如果是液相测定药材含量时，使用外标一点法，用不同浓度对照品所做的标准曲线（工作曲线，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标），能否将供试品测的峰面积代入标准曲线计算其含量？这和公式（C对照品/C供试品=A对照品/A供试品)计算出来的结果是否一致，二者的区别是什么，误差哪个大些，计算时是用后者吗？在此先谢过了
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4楼2012-06-26 00:21:03
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用不同浓度对照品所做的标准曲线（工作曲线，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标），将供试品测的峰面积代入标准曲线计算其含量，这是外标法。

C对照品/C供试品=A对照品/A供试品)计算出来的是外标一点法。
在对照与样品浓度很接近的时候，两者结果差异不大。但是如果差别大的话，由于外标一点实际上是原点和单个对照一点的连线做标准曲线，没有截距、斜率也不一定准，误差会很大。
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天道酬勤！
5楼2012-06-27 09:03:28
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