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zuihuaying

银虫 (小有名气)


[交流] 液相含量测定计算供试品含量探讨

在用液相测定药材含量时,使用外标一点法,用不同浓度对照品所做的标准曲线(工作曲线,以对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标),液相做标准曲线的目的是使供试品的峰面积处于线性范围内,能否将供试品测的峰面积代入标准曲线计算其含量?这和公式(C对照品/C供试品=A对照品/A供试品)计算出来的结果是否一致,二者的区别是什么,误差哪个大些,计算时是用后者吗?
测定供试品含量时,对照品峰面积怎么选择,选择的依据是什么?比如说用不同浓度对照品做的标准曲线上的6个点,有6个对照品峰面积,测定某个供试品含量时是否以6个对照品峰面积中最接近的一个来计算,还是要选定其中一个固定的峰面积来计算所有供试品的含量,计算时还是使用公式C对照品/C供试品=A对照品/A供试品吗?问题比较多哈,在此先谢过各位了哈
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heying136

禁虫 (小有名气)


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2楼2012-06-26 08:04:03
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)



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一般都是代入公式求含量,不用标准曲线求。至于结果误差,你可以分别计算一下。

如果要用标准曲线求含量,直接代入曲线方程,根据所得浓度结果求出含量。这一步应该用到C/C=A/A
3楼2012-06-26 08:19:47
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首先你做标准曲线的目的是你测定的物质配制的浓度应该在标准曲线浓度的范围内,比如你做的是1、2、3、4、5、6mg/ml那么你配制的对照品浓度和样品浓度也应该在1mg/ml-6mg/ml的范围,这样的话才说明你测定的物质在线性范围内,如果你测定的浓度在这之外的话可能就存在误差,因为可能不在线性范围内。其次你测定物质在线性范围内的话,你测定用外表法,只是取其中的2点进行对比计算而已,因为2点可以确定一条直线,只要你没有其他的误差,应该来说是误差比较小的,当然也可以代入线性公式里计算。
对照峰面积选择一般是选择你线性范围的中间点即可。当然这也要根据你样品中含量来确定浓度。
4楼2012-06-26 08:43:29
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zuihuaying

银虫 (小有名气)


选取标准曲线上的两个点进行计算,具体的计算过程是怎样的,麻烦举个实例,谢谢大家啦
5楼2012-06-26 16:42:08
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fenghaiyan82

木虫 (正式写手)



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个人认为,计算供试品含量时,应该利用工作曲线,也就是说将供试品谱图中的待测物峰面积代入工作曲线,根据工作曲线计算出待测物含量,当然计算前提供试品中待测物含量要在该工作曲线的线性范围之内首先要满足。利用工作曲线计算待测物含量正是我们建立工作曲线的目的,如果按公式C对照品/C供试品=A对照品/A供试品计算含量,是否相当于把工作曲线看成是一条通过原点的直线呢?而工作曲线大多为y=ax+b的形式。仅供参考。
6楼2012-06-27 08:08:01
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kennywong

木虫 (正式写手)



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标曲用来验证方法是否可行,这时用加样回收率考察线性范围。
做含测是一般用外标一点法使对照品浓度略高于供试品,或者外标两点法将供试品浓度位于两点中间
7楼2012-06-27 13:52:21
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wellyuezi

铁虫 (初入文坛)



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其实你选取曲线上的两个点进行测量时效果仅仅是验证一下对照的稳定性,跟药检所采用的分别制作两个对照品,取其平均的F值进行计算效果一样。
  F=C对照/A对照      
C样=A样*F平均
8楼2012-06-27 15:34:11
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