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yanlili

金虫 (正式写手)


[求助] 纯化蛋白质的过程中核酸去除率的计算 已有1人参与

在蛋白质层析的过程中,工艺中会计算杂蛋白去除率和核酸去除率。核酸去除率一般怎么得到呢?用什么办法去测定?
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heylixing

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
紫外吸收测蛋白,会被核酸,色素干扰的。测出来,不代表就有。
2楼2014-04-30 19:59:42
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yanlili

金虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by heylixing at 2014-04-30 19:59:42
紫外吸收测蛋白,会被核酸,色素干扰的。测出来,不代表就有。

?这好像不是我的问题?
3楼2014-05-05 11:12:46
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heylixing

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yanlili at 2014-05-05 11:12:46
?这好像不是我的问题?...

(a)来源于细胞基质的杂质包括(但不仅限于这些)宿主蛋白、核酸(宿主基因组、质粒或总 DNA)。对宿主细胞蛋白,通常选用对蛋白质杂质检测范围较宽、又较灵敏的方法进行,如免疫分析法。如采用免疫分析法进行检测,该法中所使用的多克隆抗体应是用无编码产品的基因和融合组分的生产细胞或用其他符合要求的细胞免疫动物后制备所得。宿主细胞DNA 水平可以用直接分析产品的方法(如杂交技术)而测得。清除研究(包括实验室规模的叠加实验)可用以证明来源于细胞基质的杂质(如核酸、宿主细胞蛋白)是否清除,有时也可说明无须对此杂质建立认可标准。

ICHQ6a的一段话,自己理解下。
4楼2014-05-05 22:37:20
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heylixing

铁虫 (正式写手)

(a)来源于细胞基质的杂质包括(但不仅限于这些)宿主蛋白、核酸(宿主基因组、质粒或
总 DNA)。对宿主细胞蛋白,通常选用对蛋白质杂质检测范围较宽、又较灵敏的方法进行,
如免疫分析法。如采用免疫分析法进行检测,该法中所使用的多克隆抗体应是用无编码产品
的基因和融合组分的生产细胞或用其他符合要求的细胞免疫动物后制备所得。宿主细胞
DNA 水平可以用直接分析产品的方法(如杂交技术)而测得。清除研究(包括实验室规模的叠
加实验)可用以证明来源于细胞基质的杂质(如核酸、宿主细胞蛋白)是否清除,有时也可说明
无须对此杂质建立认可标准。

ICHQ6b的一段话,自己理解下,我不是做质量的,也不怎么懂。
5楼2014-05-05 22:39:22
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