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β-葡萄糖苷酶测Km时底物浓度(PNPG)已经特别高(比其他文献上高出10倍了),但是达不到零级反应,这是怎么回事,跟一级反应时间有关吗?(酶液已经稀释了100倍),蛋白浓度是4.305mg/ml。通常选择底物浓度梯度的话应该怎么设置呢(测酶活是用的底物终浓度是5mM)? |
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