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我爱科学2012木虫 (正式写手)
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基因敲除中,阳性克隆抗生素最低致死浓度(即阳性克隆筛选浓度)的确定!!!!!! 已有1人参与
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如题,本人在做酵母的基因敲除实验,但是苦于对抗生素最低致死浓度的确定,不知道怎么确定。就是说对野生株某种抗生素(如G418,Zeocin等)最低致死浓度(就是后续的抗生素抗性筛选浓度),这个是怎么确定的? 我的做法是:将菌种挑取单菌落培养至对数期后,取100微升涂布在 几个含抗生素浓度梯度的平板上面,之后放在30度培养,没有形成单菌落的平板对应的抗生素浓度就是最低致死浓度,最后将此浓度作为后续的抗生素抗性筛选浓度。 不知道这样做对不对?大家是怎么做的。谢谢各位的指教!!!!! ![]() ![]() |
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jingzhouding
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