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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 求助：信号通路WB检测之前细胞处理
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polly2879

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：信号通路WB检测之前细胞处理 已有1人参与

刚涉及信号通路这一块，做法是用WB的方法检测信号通路相关因子的磷酸化和未磷酸化。
细胞养的过程中是加了血清的，但血清对信号通路的影响是不可忽视的。
所以在对细胞进行刺激之前，是否要对细胞进行比如像饥饿处理一样的操作？操作时间和操作方法是怎样呢？
我养的是J774细胞，培养基是10%FBS的DMEM。之前实验的时候是用无血清的DMEM处理12个小时再刺激，可是有的信号通路比如ERK1/2还是激活得很厉害。
想想各位大神请教，尤其是有这方面经验的大神，谢谢了
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1楼 2014-04-21 14:36:03
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amy123yhr

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wind-flying at 2014-04-23 12:56:39
自噬还是凋亡？要做什么条件？我做的是A549细胞，培养基是10%FBS，一般来说24h以上无血清条件下会对自噬影响，所以做自噬实验就要加血清。

你好，你是说血清过少会造成饥饿效应从而影响自噬么？你加的血清是多少啊？
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5楼2015-08-17 10:22:24
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wind-flying

铜虫 (初入文坛)
★
youlinglyw: 金币+1, 感谢解答 2014-04-23 22:49:02
youlinglyw: 屏蔽内容 2014-04-23 22:49:34
本帖内容被屏蔽
2楼2014-04-23 12:34:03
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wind-flying

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
自噬还是凋亡？要做什么条件？我做的是A549细胞，培养基是10%FBS，一般来说24h以上无血清条件下会对自噬影响，所以做自噬实验就要加血清。
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Travelingaroundtheworld
3楼2014-04-23 12:56:39
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纸鸢之梦

至尊木虫 (著名写手)
你好，我也想做这方面的研究，请问你的J774细胞能否赠予一些呢，非常感谢
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4楼2014-05-09 16:36:53
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