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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 植物H2O2测定 已有1人参与

文献上测H2O2的方法是:To 0.5 ml of the supernatant, 0.5 ml of
phosphate buffer (pH 7.0) and 1.0 ml of potassium
iodide (1 M) were added.The absorbance of the
mixture was measured at 390 nm. H2O2 content was
determined using an extinction coefficient (e) of
0.28 μM-1 cm-1 and expressed as nmol g1 FW.
这个地方加完KI后,需不需要暗反应1小时呢?测完吸光度,H2O2浓度怎么计算呢?不需要做标曲嘛?文献上最后好像是用消光系数0.28来计算H2O2浓度的?假如我想做标曲来计算H2O2浓度的话,是不是配一系列浓度的H2O2,然后取1mL各浓度的H2O2再+1mL KI(1M),去测吸光度,做标曲就行了?这种做标曲的方法对吗?
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starseacow

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+3, 谢谢参与 2014-05-12 08:36:37
1 需要
2 根据你的标准曲线算
3 我没看过这样的方法,很难判断是否合适。你要想用这种方法做,最好追根溯源,看看最远始文献怎么写的。我个人建议你照以前我建议过得碘量法步骤测定。标准曲线通过在磷酸盐缓冲液中配置不同浓度H2O2测定获得,H2O2可以使用新鲜的30%分析纯过氧化氢。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2014-04-19 21:14:53
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a71840584

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-04-19 21:14:53
1 需要
2 根据你的标准曲线算
3 我没看过这样的方法,很难判断是否合适。你要想用这种方法做,最好追根溯源,看看最远始文献怎么写的。我个人建议你照以前我建议过得碘量法步骤测定。标准曲线通过在磷酸盐缓冲液中 ...

好的,谢谢,我也打算用标准曲线来计算,只是你说用磷酸缓冲液配H2O2是为什么呢?我做标曲加2ml(1M)的KI对嘛??我看植物生理学实验指导上是加2.5%的KI啊

[ 发自小木虫客户端 ]
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2014-04-20 01:23:49
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by a71840584 at 2014-04-20 01:23:49
好的,谢谢,我也打算用标准曲线来计算,只是你说用磷酸缓冲液配H2O2是为什么呢?我做标曲加2ml(1M)的KI对嘛??我看植物生理学实验指导上是加2.5%的KI啊
...

你的方法中写样品加缓冲液,配标准曲线,H2O2也需要加同样的缓冲液
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2014-04-20 04:45:05
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