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虫子驾到银虫 (小有名气)
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还是HPLC问题 已有2人参与
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今天发现一个比较奇怪的现象，我用乙腈/0.2%三乙胺水溶液跑两个标准品，随着水相比例的增大，不仅出峰时间后移，而且两个峰高都随着变小，不知道大侠们如何解释这个现象？ 还有就是，我怀疑我的柱子被冲坏了，每次调流动相比例的时候，压力变化都比之前慢很多，但是最后也能达到正常值，哪位大侠有这方面的经验，能否帮忙确认一些呢？ |
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喵喵与咩咩
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对于第一个问题：推测你的柱子是C18或者C8柱，使用的是反相色谱法，C18或者C8属于非极性固定性，你的流动相由乙腈-0.2%三乙胺构成，目标化合物是非极性或者弱极性，你说三乙胺比例增加，那就是说流动相极性增加，根据相似相容原理，你的目标化合物被流动相冲洗出柱子变慢，出峰自然就变慢了啊。出峰时间后移，峰高变小，必然峰宽变宽，柱效下降。不知道你是做含量还是有关物质，含量的话，一般主成分保留时间控制在10min以内就可以，有关物质的话尽量让杂质都分离出来，分离度较好，主成分的柱效不用考虑太多。 对于第二个问题：调整流动相比例，柱压慢慢上升才是正常的，柱子不会那么容易坏，冲柱子或者走样品之前先询问购买柱子厂商的工程师，询问注意事项，当然你也可以看看柱子的使用说明书。评判柱子是否坏了，你可以进一个对照品，并与你最初进这个对照品的出峰时间，理论塔板数，对称因子等比较。 |
2楼2014-04-16 16:45:15
虫子驾到
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