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mutushan

新虫 (初入文坛)

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[求助] 微生物量氮测定已有3人参与

想问一下土壤微生物量氮测定时的一些注意事项，麻烦各位有做过的吗

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1楼2014-04-16 11:27:08

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jndh123

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2014-04-16 15:00:18
你是用凯氏定氮法么。是的话有以下注意事项：
（1）样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀。
　　（2）样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上。万一沾附可用少量水冲下，以免被检 ...

老师您好，我最近在做微生物量氮的测定，需要跟踪每6小时才一次土壤样品检测微生物量氮的变化过程，想请教您一下，我这样的样品如何预培养，还是说不需要预培养。
我目前的检测方法是先把土壤样品全部收集保存在4度的冰箱内，然后集中放入进行氯仿熏蒸，取出后检测总氮含量。方法上有什么不妥吗？我的检测结果总是熏蒸的氮含量变动很大，会接近甚至小于未熏蒸的样品。希望能解答我的疑惑。谢谢您了。

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5楼2016-09-16 21:04:31

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xiaoamuchong

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, good！ 2014-05-09 23:16:59

你是用凯氏定氮法么。是的话有以下注意事项：
（1）样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀。
　　（2）样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上。万一沾附可用少量水冲下，以免被检样消化不完全，结果偏低。
　　（3）硝化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入30%过氧化氢（H2O2）2-3ml，促使氧化。
　　（4）在整个消化过程中，不要用强火。保持和缓的沸腾，使火力集中在凯氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下，使氮有损失。
　　（5）如硫酸缺少，过多的硫酸钾会引起氨的损失，这样会形成硫酸氢钾，而不与氨作用。因此，当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时，要增加硫酸的量。
　　（6）加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点，硫酸铜为催化剂，硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。
　　（7）混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。
　　（8）氨是否完全蒸馏出来，可用PH试纸试馏出液是否为碱性。
　　（9）吸收液也可以用0.01当量的酸代表硼酸，过剩的酸液用0.01N碱液滴定，计算时，A为试剂空白消耗碱液数，B为样品消耗碱液数，N为碱液浓度，其余均相同。
　　（10）以硼酸为氨的吸收液，可省去标定碱液的操作，且硼酸的体积要求并不严格，亦可免去用移液管，操作比较简便。
　　（11）向蒸馏瓶中加入浓碱时，往往出现褐色沉淀物，这是由于分解促进碱与加入的硫酸铜反应，生成氢氧化铜，经加热后又分解生成氧化铜的沉淀。有时铜离子与氨作用，生成深l蓝色的结合物[Cu(NH3)4]2+
　　（12）这种测算方法本质是测出氮的含量，再作蛋白质含量的估算。只有在被测物的组成是蛋白质时才能用此方法来估算蛋白质含量。

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