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色谱柱用一段时间柱效降低 已有2人参与
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| 色谱柱用过一段时间之后柱效明显降低，拖尾因子也大很多，怎么回事？柱子用的时间也没有很长，不过因为采样时间不是很短，会在下班后继续采样并且设置程序冲洗柱子，这样会对柱子有影响吗？还有，想问下，保存色谱柱的溶剂有限制吗？甲醇乙腈都可以吧？ |
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柱效降低伴随拖尾，有几种可能。一是流动相pH过高或过低（超出2.5~6的范围），导致色谱柱填料劣化，一般进样两百针以内就会有明显的变化（正常寿命2000~3000针）；而是疏水塌陷，由过低有机相比例的水溶液保存导致；其三，色谱柱部分堵塞或填料污染，导致柱内流体行为发生变化，通常伴随反压升高，较容易判断，可以用反冲、更换柱头填料来修复；其四也是较坏的一种可能，C18流失，硅羟基增多。这主要是应为在C18柱上长时间使用过强的溶剂造成，比如乙酸乙酯和四氢呋喃。另外也可能由于使用乙腈或异丙醇长时间保存色谱柱导致。 设置自动冲柱程序，有几个经验分享：1.在程序的最后，逐步减小流速，避免对色谱柱机械性损伤。2. 冲柱期间保持柱温，以便杂质和缓冲盐更快洗脱，有必要时可适当升高柱温。3.使用甲醇或乙腈冲洗干净后，没必要一定使用纯有机相保存色谱柱，可按说明书上色谱柱封存条件进行保存。4.如果分析时是使用梯度程序，或已保证冲出全部杂质成分，且一周内还要继续使用，不一定必须要使用纯有机相进行冲洗。5.色谱柱的保存，色谱柱两端的密封性比冲洗的干净程度更重要。 |
9楼2014-04-16 16:28:27
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