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大家帮我看看我的overlap怎么回事？ 已有1人参与
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我想把gene1和gene2 通过linker链接起来，做法是gene1-linker-gene2或者gene2-linker-gene1，两种方法分别拿到片段，如下图1， 然后扩增全长时出现了问题，如图2所示，请大侠分析一下，如何改善？谢谢  140412-Vgb+P(5 TUBE)-分段PCR副本.jpg  2014413-PCR2全长副本.jpg |
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【答案】应助回帖
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myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-14 11:42:47
wncgliu86: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-17 14:44:08
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你的gene2的片段有些杂条带，建议做一下切胶回收之后在进行拼接 还有就是在拼接的时候要测定DNA的浓度，算出moler比例，要保证两个片段的摩尔比例为1：1 如果无法测定浓度的话，就要多实验几个浓度的比例条件，看一下效果 拼接的时候，引物的浓度要低，可以实验一下采用正常浓度的1/10（可以扩展出来），有助于拼接 |
2楼2014-04-14 11:25:04
