| 查看: 5053 | 回复: 24 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
目的片段和载体连接一直不上 已有7人参与
|
||
|
1、目的片段738bp（两端带酶切位点）,载体选择pCAMBIA3301,酶切位点选择Nco I和BstE II。载体确定已经双酶切开来，目的片段应该也双酶切成功（电泳图片看不出来）。用的Promega的T4连接酶，载体和目的片段摩尔比1:5，反应体系20ul，22℃连接3.5小时，转化至DH5α，未出现菌落。 2、也有说将目的片段和T载体先连接，然后再和表达载体连接，这样更容易连上。原理是什么，不懂。 感谢您的帮助。 |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有124人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有1人回复
owl2010
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2619.7
- 散金: 608
- 红花: 24
- 帖子: 433
- 在线: 700.3小时
- 虫号: 1338696
- 注册: 2011-07-06
- 性别: GG
- 专业: 林木遗传育种学
赵晓楠zxn11楼2014-04-14 16:22:51
for5
木虫 (正式写手)
- 应助: 127 (高中生)
- 金币: 3356.6
- 红花: 10
- 帖子: 880
- 在线: 283.6小时
- 虫号: 696070
- 注册: 2009-02-04
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2014-04-12 20:57:42
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-04-12 22:46:37
淘淘279
铜虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 934.8
- 帖子: 64
- 在线: 16.4小时
- 虫号: 2670382
- 注册: 2013-09-22
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2014-04-12 23:06:33
5