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PAGE电泳跑单个核酸序列出现4个条带让我很纠结
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zhangye232
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PAGE电泳跑单个核酸序列出现4个条带让我很纠结
已有1人参与
核酸序列是5‘ TTTTTTTCAACATCAGTCTGATAAGCTAGACTGATGTTGATAGCTTATCAGACTGA 3’ 巯基标记的5'端 本来是希望序列是形成一个发夹结构,但是最后电泳跑出4条带出来 最右边是我的那个核酸序列,, 旁边是500的MAKER 最左边是20的MAKER 求大神帮忙分析
{]~V[(N~L`37AT6%`)5EJW4.jpg
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2014-04-07 12:59:51
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
zhangye232: 金币+5,
★★★
很有帮助
2014-04-07 17:54:51
你跑的是singe stranded DNA, 还是双链DNA?你跑的电泳是变性还是非变性?
我假定是单链DNA,非变性电泳
如果你电泳条件够温和,没有大量发热的情况下,你的DNA可以形成好多种稳定的hairpin的结构(Tm> 50°C),所以出现几种结构完全可能。
如果你想确认,而且你可以做放射性实验室的话,可以跑变性胶,看是否是一条带
或如果你的条带上面有发光基团,也可以跑变性胶,看是否是一条带。
GOOD LUCK
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行至水穷处,坐看云起时
2楼
2014-04-07 15:25:37
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
zhangye232: 金币+3,
★
有帮助
2014-04-07 17:55:02
最亮的两条带,个人揣测,一条是自己形成的hairpin,另外一条是两条引物彼此形成的dimer,另外两条就是此级稳定的单引物和双引物
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3楼
2014-04-07 15:46:16
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