| 查看: 3940 | 回复: 3 | ||
bjgymilyxz木虫 (小有名气)
|
[求助]
免疫荧光目的蛋白定位异常 已有1人参与
|
|
各位亲，本人最近做细胞爬片的免疫荧光染色，得到了如下图片，但是不知道为什么目的蛋白定位异常，请教各位大虾。我养的前体脂肪细胞，梭形的，一抗是abcam的兔抗人的多抗，二抗分别是Alexa 488标记的绿色。检测的目的蛋白应该定位在细胞质，但是，我的前后2次染色结果不同，一次是大部分定位于细胞质，后一次则大部分出现在细胞核，不知道哪里出了问题，请给我赐教！！ 具体染色步骤：1. 3.7% 多聚甲醛 15min; 2. 0.1% Trion-X 10min; 3. 10% Normal Serum 30 min, 4. 1抗 4度 14-16 h; 5. 2抗 室温 1 h; 6. Hoechst 10min 第1张图片目的蛋白的绿色荧光出现在细胞质和细胞核，以胞核为主；第2张图片的目的蛋白以胞浆为主。 为什么同一个蛋白在同一种细胞中做出的荧光结果，有的是以胞核为主，而有的又是以胞浆为主呢，abcam的说明书显示目的蛋白定位于细胞质的。  这张目的蛋白的绿色荧光出现在细胞质和细胞核，以胞核为主  后面这张图片的目的蛋白以胞浆为主。 |
回复此楼» 猜你喜欢
论文撤稿了
已经有8人回复
-
博士申请
已经有7人回复
-
青B发送上会通知了吗
已经有8人回复
-
化学专业申博
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
评审有感
已经有27人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 间接免疫荧光定位染色步骤中甲醇的作用
已经有8人回复
- 免疫染色的细胞爬片总是脱落
已经有9人回复
- 分泌蛋白的亚细胞定位
已经有7人回复
- 细胞提蛋白做western blot
已经有9人回复
- 细胞免疫荧光固定
已经有4人回复
- 免疫荧光染色，western blot均有目的蛋白，但是RT-PCR总是没有条带
已经有5人回复
- 免疫荧光一抗可以与目的蛋白是相同种属吗
已经有6人回复
- 能否抑制某一特地蛋白，基因敲除方法除外。
已经有3人回复
- 亚细胞定位，那种核染色试剂比较好
已经有3人回复
- 荧光融合蛋白检测目的基因的表达
已经有3人回复
- 求助EGFP蛋白的western及免疫荧光问题！！！！！急急急！！！！！
已经有4人回复
- 做信号通路的，是不是要做定位才好！？
已经有5人回复
- 线粒体内膜蛋白 转定位表达在细胞膜上
已经有14人回复
- 请问免疫定位是什么意思啊
已经有5人回复
- 在北京或天津能做免疫荧光技术（细胞膜蛋白分子的检测）的生物公司有哪些？
已经有1人回复
- 有谁知道PE是什么？用来做标记物，红色荧光
已经有7人回复
- 【资料】ELISA、western blot、抗体、蛋白、核酸、免疫荧光等·pierce公司实验手册
已经有288人回复
- 【求助/交流】有没有可以在细胞中定位的荧光蛋白
已经有9人回复
- 【求助/交流】请教一下，如果做通道蛋白的免疫荧光和WB选哪家的抗体最好
已经有5人回复
- 【求助/交流】绿色荧光蛋白时有时无怎么回事？
已经有8人回复
d00614028
银虫 (小有名气)
- BioEPI: 4
- 应助: 76 (初中生)
- 金币: 1148.6
- 红花: 4
- 帖子: 150
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 650785
- 注册: 2008-11-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2014-04-04 15:55:48
bjgymilyxz
木虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2563.4
- 散金: 3
- 帖子: 155
- 在线: 165.4小时
- 虫号: 1546167
- 注册: 2011-12-21
- 专业: 畜牧学
3楼2014-04-04 20:49:22
4楼2017-11-27 20:53:29
10