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aytdsg

新虫 (初入文坛)

[求助] 小肽分子量验证?已有1人参与

提取金华火腿中的小肽,用超滤分离得到分子量分别为<1000Da;1000~3000Da;>3000Da三段组分的小肽,用SDS-PAGE电泳方法是否可以验证得到的小肽为目标分子量,如果可以的话胶的比例是多少?如果不行,有什么其他方法可以进行验证么?求大神指导,谢谢。
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掺水的葡萄酒

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这么小的肽用电泳很难把,如果非要看的话,用15%或20%的胶吧,其他方法应该很多啊,跑个液相?打个质谱?
2楼2014-04-03 15:39:58
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aytdsg

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 掺水的葡萄酒 at 2014-04-03 15:39:58
这么小的肽用电泳很难把,如果非要看的话,用15%或20%的胶吧,其他方法应该很多啊,跑个液相?打个质谱?

这个加入Trincne之类的行么?兄台对这种有了解么?15%或20%是分离胶么,本人小白请见谅
3楼2014-04-04 10:21:21
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掺水的葡萄酒

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hsd3521: 应助指数+1 2014-04-04 10:47:21
aytdsg: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢了,兄台。有空还请你帮忙了 2014-04-05 10:33:41
Tricine胶是三层胶,从上到下浓度依次是4-5%,10%,16.5%,普通的胶就是两层,浓缩为4-5%,分离胶15%或20%,分离胶的浓度可以根据丙烯酰胺的量改变的。Trincine可以看到更全面的,从大到小基本都可以看见,大分子量的在100kDa以上的,你看你的蛋白需不需要看到这么大的,不需要的话就直接跑普通胶就好了,直接看小分子量,三层胶配胶跑胶很费事费钱啊~
4楼2014-04-04 10:31:31
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pal7788

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
学习了
5楼2014-04-22 09:57:52
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ccdeweidao

铜虫 (小有名气)

请问楼主用超滤提取到分子量为<1000Da;1000~3000Da;>3000Da小肽的超滤膜是在哪家买的,好用吗,最近在各种查分离小肽的超滤膜,求助
6楼2014-06-09 13:55:33
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renkeruyun

铜虫 (初入文坛)

做个GPC 凝胶渗透色谱,比对下标曲就行了
7楼2014-06-10 12:28:47
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