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【求助】分离分子量为3000--4000的小分子肽，用G-25凝胶分不开，请大侠指教。已有2人参与
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2楼2010-08-09 11:02:14
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢您的建议！ 2010-08-10 00:20:15
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢您的建议！ 2010-08-10 00:20:15
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对于凝胶过滤来说，许多因素影响最终的分离效果：上样体积、上样体积与柱床体积比、柱子的直径、颗粒大小、颗粒大小分布、装填密度、孔径大小、流速以及样品的粘稠度等。 1、理论上说，分子筛能上样至柱床体积30%。但为了实现精确分离一般保持上样体积与柱床体积比为0.5%-4%。在一定范围内，上样体积越小分离效果越好。 2、凝胶颗粒越小，溶质扩散越快，从而峰形显得细而尖锐。反之，颗粒越大，扩散越慢，峰变得宽而平。 3、柱子细而高可以提高分离度。一般来说，柱子提高一倍，分离效果提升40%。 4、流速越小，分离效果越好。因为大分子从外水体积直接通过，小分子进入填料空隙内，流速越小，压力越小，小分子在空隙内速度越慢，跟大分子越容易分开。 5、样品最好浓缩，以提高纯化效率。 建议：使用颗粒细小的G25填料，如果有多根可以串联起来以增加柱床高度，适当降低流速 |
3楼2010-08-09 15:59:04
4楼2010-08-10 11:23:08