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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 请问这样能否发生荧光能量共振转移
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安静旅游吧

新虫 (正式写手)

[求助] 请问这样能否发生荧光能量共振转移 已有1人参与

蓝色的是供体的发射曲线，红色的是受体固定激发扫的发射曲线（所以受体本身也是有荧光的）。请问两者能发生荧光能量共振转移吗？如果当两都的距离很远时（大于10 nm）荧光能量共振转移是否会抑制？
红色受体的紫外吸收浓度太低，药品太精贵，不能去测紫外吸收。
老板不让做，说这个不能实现。自己想试，没试剂。

请问这样能否发生荧光能量共振转移
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1楼 2014-03-22 17:05:55
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安静旅游吧

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 袁1231 at 2014-03-25 03:23:38
你要有一个control，就是当距离足够远的时候，发生不了FRET，这个时候红色和蓝色发射的比值是不是发生了变化。 你这重叠的不是很多。如果样品测了可以回收的话就行啊。还有一个问题就是你这东西吸收这么低，不会担 ...

意思是两者直接混合后，改变两者浓度比，看荧光强度是否会发生变化；若变化，则不是FRET？但是浓度变化了，各自的荧光强度是会发生变化的吧？
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5楼2014-03-25 11:16:00
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袁1231

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2014-03-23 15:32:13
安静旅游吧: 金币+1 2014-03-23 20:00:49
超过10nm通常的说法是不会发生FRET了，你这个给的信息也没什么用，重点还是要看你红色的吸收光谱啊，会不会与蓝色的发射有相当的重叠，同时红色的发射又要与蓝色的发射要有一定的区分度，个人觉得FRET不是个简单的课题
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2楼2014-03-23 09:21:53
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安静旅游吧

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 袁1231 at 2014-03-23 09:21:53
超过10nm通常的说法是不会发生FRET了，你这个给的信息也没什么用，重点还是要看你红色的吸收光谱啊，会不会与蓝色的发射有相当的重叠，同时红色的发射又要与蓝色的发射要有一定的区分度，个人觉得FRET不是个简单的课 ...

就是没有找到红色的吸收光谱呀，也没办法测，老师不支持，不敢把药品拿来测，太精贵了，可能一测3000块就没有了。
一般红色的吸收前半部分与蓝色发射重叠，这样就能发生FRET。假设红色的吸收就是跟这激发光谱差不多呢，是否就不能够确定能发生FRET？老板说，就算能发生，但是红色也会吸收蓝色的激发光，不能区分是否是因为FRET使得红色曲线物质发光。
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3楼2014-03-23 20:00:33
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袁1231

金虫 (小有名气)
★
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2014-03-25 09:07:10
引用回帖:
3楼: Originally posted by 安静旅游吧 at 2014-03-23 20:00:33
就是没有找到红色的吸收光谱呀，也没办法测，老师不支持，不敢把药品拿来测，太精贵了，可能一测3000块就没有了。
一般红色的吸收前半部分与蓝色发射重叠，这样就能发生FRET。假设红色的吸收就是跟这激发光谱差不 ...

你要有一个control，就是当距离足够远的时候，发生不了FRET，这个时候红色和蓝色发射的比值是不是发生了变化。 你这重叠的不是很多。如果样品测了可以回收的话就行啊。还有一个问题就是你这东西吸收这么低，不会担心即使能FRET，你有办法检测么。
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4楼2014-03-25 03:23:38
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