应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用于DNA提取的材料如何在-80℃保存
101/1返回列表
查看: 5024  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 用于DNA提取的材料如何在-80℃保存 已有2人参与

各位大虾：我是做原生动物分子的，现在想尝试用-80℃保存分子材料以备后续提取DNA只用。但是之前没有操作过，有些细节问题希望高手指点一二：
1、材料放在-80℃冷冻之前需要预冷或者是其他的预处理吗？还是直接放在-80就行？
2、使用普通EP管可以吗？
3、从-80取出的材料要如何解冻对DNA的损伤最小呢？
多谢指点！感激不尽！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
越努力越幸运
1楼 2014-03-22 10:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
柠檬可乐星: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-23 10:05:39
用液氮先迅速冷冻，再保存在-80里
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-03-22 15:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-22 15:47:17
用液氮先迅速冷冻，再保存在-80里

请问必须用液氮预处理吗？因为我实验量很小，实验室也没有现成的液氮，所以想看能不能把液氮处理这一步给省了
赞一下 回复此楼
越努力越幸运
3楼2014-03-22 20:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-03-22 20:41:07
请问必须用液氮预处理吗？因为我实验量很小，实验室也没有现成的液氮，所以想看能不能把液氮处理这一步给省了...

这一步可以省，
回复此楼
hehe
4楼2014-03-22 21:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanhaizhixin

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-22 15:47:17
用液氮先迅速冷冻，再保存在-80里

都液氮-170度了，再转-80的原因是？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-23 01:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lanhaizhixin at 2014-03-23 01:11:23
都液氮-170度了，再转-80的原因是？
...

迅速冷冻保证材料中核酸的完整性防止被降解
赞一下 回复此楼
hehe
6楼2014-03-23 08:38:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅子清酒

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-23 10:05:37
柠檬可乐星: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-23 10:06:00
可以直接省略液氮放在-80的。关键是你的材料是什么啊？一般的植物材料的话拿出来提DNA之前还是需要用液氮研磨的啊。所以要想损伤小，研磨之前的准备工作要充足，尽量拿出来就可以直接研磨提取了
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-23 09:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 梅子清酒 at 2014-03-23 09:17:26
可以直接省略液氮放在-80的。关键是你的材料是什么啊？一般的植物材料的话拿出来提DNA之前还是需要用液氮研磨的啊。所以要想损伤小，研磨之前的准备工作要充足，尽量拿出来就可以直接研磨提取了

您好！我做的是原生动物，单个个体平均300um，平时我提DNA就直接把单个体磨碎了提的，像这么小的个体，-80冷冻完的解冻是不是就不用那么麻烦呢？
赞一下 回复此楼
越努力越幸运
8楼2014-03-23 10:04:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅子清酒

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-03-23 10:04:51
您好！我做的是原生动物，单个个体平均300um，平时我提DNA就直接把单个体磨碎了提的，像这么小的个体，-80冷冻完的解冻是不是就不用那么麻烦呢？...

原生动物的提取有它自己的一套方法的，具体的你可以去查阅一些相关文献。大部分文献里都是拿新鲜的液体用酶消化，因为原生动物个体太小，按你之前的单个个体磨碎了提可能会存在没有完全碾磨的情况。不过，如果你之前能提出来，那就还是可以的。
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-24 09:50:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 梅子清酒 at 2014-03-24 09:50:14
原生动物的提取有它自己的一套方法的，具体的你可以去查阅一些相关文献。大部分文献里都是拿新鲜的液体用酶消化，因为原生动物个体太小，按你之前的单个个体磨碎了提可能会存在没有完全碾磨的情况。不过，如果你之 ...

嗯 好的  我先试试吧  谢啦
赞一下 回复此楼
越努力越幸运
10楼2014-03-25 10:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 柠檬可乐星 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 言之凿凿，明天官网会通知放榜？ +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭