应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用于DNA提取的材料如何在-80℃保存
101/1返回列表
查看: 4648  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 用于DNA提取的材料如何在-80℃保存 已有2人参与

各位大虾：我是做原生动物分子的，现在想尝试用-80℃保存分子材料以备后续提取DNA只用。但是之前没有操作过，有些细节问题希望高手指点一二：
1、材料放在-80℃冷冻之前需要预冷或者是其他的预处理吗？还是直接放在-80就行？
2、使用普通EP管可以吗？
3、从-80取出的材料要如何解冻对DNA的损伤最小呢？
多谢指点！感激不尽！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
越努力越幸运
1楼 2014-03-22 10:38:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
柠檬可乐星: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-23 10:05:39
用液氮先迅速冷冻，再保存在-80里
赞一下 回复此楼
hehe
2楼2014-03-22 15:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-22 15:47:17
用液氮先迅速冷冻，再保存在-80里

请问必须用液氮预处理吗？因为我实验量很小，实验室也没有现成的液氮，所以想看能不能把液氮处理这一步给省了
赞一下 回复此楼
越努力越幸运
3楼2014-03-22 20:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-03-22 20:41:07
请问必须用液氮预处理吗？因为我实验量很小，实验室也没有现成的液氮，所以想看能不能把液氮处理这一步给省了...

这一步可以省，
回复此楼
hehe
4楼2014-03-22 21:13:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanhaizhixin

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-22 15:47:17
用液氮先迅速冷冻，再保存在-80里

都液氮-170度了，再转-80的原因是？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-23 01:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lanhaizhixin at 2014-03-23 01:11:23
都液氮-170度了，再转-80的原因是？
...

迅速冷冻保证材料中核酸的完整性防止被降解
赞一下 回复此楼
hehe
6楼2014-03-23 08:38:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅子清酒

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-23 10:05:37
柠檬可乐星: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-23 10:06:00
可以直接省略液氮放在-80的。关键是你的材料是什么啊？一般的植物材料的话拿出来提DNA之前还是需要用液氮研磨的啊。所以要想损伤小，研磨之前的准备工作要充足，尽量拿出来就可以直接研磨提取了
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-23 09:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 梅子清酒 at 2014-03-23 09:17:26
可以直接省略液氮放在-80的。关键是你的材料是什么啊？一般的植物材料的话拿出来提DNA之前还是需要用液氮研磨的啊。所以要想损伤小，研磨之前的准备工作要充足，尽量拿出来就可以直接研磨提取了

您好！我做的是原生动物，单个个体平均300um，平时我提DNA就直接把单个体磨碎了提的，像这么小的个体，-80冷冻完的解冻是不是就不用那么麻烦呢？
赞一下 回复此楼
越努力越幸运
8楼2014-03-23 10:04:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅子清酒

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-03-23 10:04:51
您好！我做的是原生动物，单个个体平均300um，平时我提DNA就直接把单个体磨碎了提的，像这么小的个体，-80冷冻完的解冻是不是就不用那么麻烦呢？...

原生动物的提取有它自己的一套方法的，具体的你可以去查阅一些相关文献。大部分文献里都是拿新鲜的液体用酶消化，因为原生动物个体太小，按你之前的单个个体磨碎了提可能会存在没有完全碾磨的情况。不过，如果你之前能提出来，那就还是可以的。
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-24 09:50:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 梅子清酒 at 2014-03-24 09:50:14
原生动物的提取有它自己的一套方法的，具体的你可以去查阅一些相关文献。大部分文献里都是拿新鲜的液体用酶消化，因为原生动物个体太小，按你之前的单个个体磨碎了提可能会存在没有完全碾磨的情况。不过，如果你之 ...

嗯 好的  我先试试吧  谢啦
赞一下 回复此楼
越努力越幸运
10楼2014-03-25 10:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 柠檬可乐星 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学308分求调剂 +5 你好明天你好 2026-03-23 6/300 2026-03-23 11:02 by 素颜倾城1988
[考研] 085600材料与化工 +10 安全上岸！ 2026-03-16 10/500 2026-03-23 09:31 by Jy?
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +6 生物工程调剂 2026-03-17 10/500 2026-03-22 20:22 by edmund7
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭