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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用于DNA提取的材料如何在-80℃保存
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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 用于DNA提取的材料如何在-80℃保存 已有2人参与

各位大虾：我是做原生动物分子的，现在想尝试用-80℃保存分子材料以备后续提取DNA只用。但是之前没有操作过，有些细节问题希望高手指点一二：
1、材料放在-80℃冷冻之前需要预冷或者是其他的预处理吗？还是直接放在-80就行？
2、使用普通EP管可以吗？
3、从-80取出的材料要如何解冻对DNA的损伤最小呢？
多谢指点！感激不尽！
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1楼 2014-03-22 10:38:11
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梅子清酒

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-23 10:05:37
柠檬可乐星: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-23 10:06:00
可以直接省略液氮放在-80的。关键是你的材料是什么啊？一般的植物材料的话拿出来提DNA之前还是需要用液氮研磨的啊。所以要想损伤小，研磨之前的准备工作要充足，尽量拿出来就可以直接研磨提取了
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7楼2014-03-23 09:17:26
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梅子清酒

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 柠檬可乐星 at 2014-03-23 10:04:51
您好！我做的是原生动物，单个个体平均300um，平时我提DNA就直接把单个体磨碎了提的，像这么小的个体，-80冷冻完的解冻是不是就不用那么麻烦呢？...

原生动物的提取有它自己的一套方法的，具体的你可以去查阅一些相关文献。大部分文献里都是拿新鲜的液体用酶消化，因为原生动物个体太小，按你之前的单个个体磨碎了提可能会存在没有完全碾磨的情况。不过，如果你之前能提出来，那就还是可以的。
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9楼2014-03-24 09:50:14
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