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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 做连接转化时遇到了问题，请教除了具体操作步骤，还需要详细注意什么细节？
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haocuihua

新虫 (初入文坛)

[交流] 做连接转化时遇到了问题，请教除了具体操作步骤，还需要详细注意什么细节？

做连接转化出了问题，长不出东西来，不知道连接转化除了基本步骤之外，还需要哪些具体的注意事项
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1楼 2014-03-15 12:44:03
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酷炫飙车

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by haocuihua at 2014-03-21 11:24:29
你怎么知道有抗性啊？你的传代次数呢，传代次数也是会影响活性的。你换个手试试！...

重组质粒是由生物公司合成的，设计的是用青霉素抗性筛选。并且已经用公司给的原始菌株做过Amp抗性验证。验证之后再提取的质粒。现在我们已经长出来了，原因可能是重组菌长得太慢，在倒置培养过夜后基本看不出明显菌落，所以以为重组失败。
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11楼2014-03-24 09:22:07
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宇盈

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
haocuihua(金币+1): 谢谢参与
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-16 14:45:59
haocuihua: 金币+1, 谢谢 2014-03-17 20:32:54
1看看你的感受态细胞是不是有问题，可以借别人的试试
2热击时温度是不是高了
3涂板时玻璃棒温度高 烫死了
4抗生素添加是否有问题
如果其他人也出现这种情况，就从培养液开始，重新弄
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4楼2014-03-15 14:12:08
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酷炫飙车

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也出现了转化失败的问题，现在挺纠结的，都不知道什么原因。
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6楼2014-03-18 14:23:40
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haocuihua

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 酷炫飙车 at 2014-03-18 14:23:40
我也出现了转化失败的问题，现在挺纠结的，都不知道什么原因。

说出来交流一下吧，我的结果出来了！
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7楼2014-03-18 16:24:29
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