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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 果蔬 » 测定蔬菜的MDA遇到的问题
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diguoxueye

金虫 (正式写手)

[交流] 测定蔬菜的MDA遇到的问题已有2人参与

我在测定MDA值的过程中遇到了几个问题。
1.TBA的TCA溶液稳定性比较差。TBA很难溶于TCA，所以，我是加热溶解，结果溶液冷却后，有出现少量的悬浮物。
2.同一批次的蔬菜样品，都是采用100℃左右的温度加热15min（用电磁炉加热，所以，温度可能在100℃左右波动），采用同样的实验方法，结果测定的实验数据中450nm的吸光值远大于532nm以及600nm处的吸光值。并且，平行实验的结果的稳定性很差，有时候，平行实验的MDA含量都是正值，有时都是负值，有时候既有正值，又有负值，但是平行试验之间的差值很大，甚至不再一个数量级上。有没有什么办法可以提高532nm吸光值，减小450nm处吸光值?
3.我采用的是下面的计算公式
其中，V0测定液体积是指什么？
测定蔬菜的MDA遇到的问题
360软件小助手截图20140305114022.jpg
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向着幸福的终点站前进，为了爱与世界和平，还是去跳楼吧
1楼2014-03-05 11:42:54
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mixi113

铁杆木虫 (正式写手)
★
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1.溶解速度确实慢，一般我是提前半天到一天的时间配好，有少量悬浮物也算正常，我做的时候也这样。
2.当时我也采用的你这个实验方法，结果和你差不多，所以直接把这个指标废弃了。100℃水浴时，样品都能沸腾，最好还是温度低一些吧。师弟做的时候是改用80℃水浴，lz再查几篇文献查考一下吧。
3.V0就是你从VT中取出用来测定吸光度的提取液的体积。比如说，假设取10g鲜样提取定容至100mL，这100mL就是VT，提取液总体积；量取1.0mL提取液放入试管，再加入5.0mLTBA，反应后待测，那么这里所量取的1.0mL提取液就是V0。
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世上无事，何须自扰
2楼2014-03-05 12:59:10
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、溶解的时候超声一下
2、沸水浴怎么会温度不稳定？
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3楼2014-03-07 16:55:56
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diguoxueye

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mixi113 at 2014-03-05 12:59:10
1.溶解速度确实慢，一般我是提前半天到一天的时间配好，有少量悬浮物也算正常，我做的时候也这样。
2.当时我也采用的你这个实验方法，结果和你差不多，所以直接把这个指标废弃了。100℃水浴时，样品都能沸腾，最好 ...

你好。如果我采用以下方法呢？称取蔬菜样品3g，30mL 100g/L  TCA溶液，研磨，过滤。
再取4mL上清液（对照组：加4.0mL 100g/L TCA）,加4.0mL0.67%TBA，混合后在沸水浴中20min，取出冷却，分别测定在450,532,600nm处波长。
请问下面这个公式是不是合适。
MDA=（6.45*（OD532-OD600）-0.559OD450）*V/(Vs*m*1000)
V——样品提取液总体积，mL
Vs——测定时所取样品提取液体积，mL
m——样品质量，g
但是根据我自己的分析，这个公式好像不是很对。我觉得应该是下面这个公式
MDA=（6.45*（OD532-OD600）-0.559OD450）*V*V1/(Vs*m*1000);
V——样品提取液总体积，mL
Vs——测定时所取样品提取液体积，mL
m——样品质量，g
V1——测定吸光度时的混合液总体积，mL
但是按照这两个公式，计算出来的MDA都非常低，基本上在10的-2次方水平上。不知道是不是因为公式不正确。
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向着幸福的终点站前进，为了爱与世界和平，还是去跳楼吧
4楼2014-06-12 11:13:10
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mixi113

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by diguoxueye at 2014-06-12 11:13:10
你好。如果我采用以下方法呢？称取蔬菜样品3g，30mL 100g/L  TCA溶液，研磨，过滤。
再取4mL上清液（对照组：加4.0mL 100g/L TCA）,加4.0mL0.67%TBA，混合后在沸水浴中20min，取出冷却，分别测定在450,532,600nm处 ...

还是第一个公式是对的。MDA的含量不可能很高的，毕竟它是膜脂过氧化作用的产物之一。
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世上无事，何须自扰
5楼2014-06-12 21:02:46
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