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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助MDA测试相关细节
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zrn_jane

木虫 (小有名气)

[求助] 求助MDA测试相关细节

有过做MDA检测的个位大侠。我的实验组样品是由于氧化应激导致大量死亡，也用光学显微镜观察到了，但是已经做了4次MDA测试，样品孔的吸光度竟然总是负，比空的都低。之后检查试验的各个步骤，有几个细节想咨询一下？
1、MDA工作液配好后应该是无色还是粉色？（实验过程中遇到过粉色，本人认为应是无色）
2. 样品-80保存。是应当收集蛋白质之后立即测还是可以保存一段时间？不知道过程中会不会受影响
3. 是否在MDA工作液与蛋白样品混合之前的操作要严格避光？
4. 蛋白浓度大概要多大才差不多呢?之前有看到说蛋白浓度低会引起检测不到氧化应激。
PS: 我用的是碧云天的MDA试剂盒
望大家积极参与讨论。谢谢！
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Theuniqueone
1楼 2012-01-16 22:59:55
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zrn_jane(金币+3): ★有帮助 谢谢参与 2012-02-22 20:20:04
我做的MDA检测是自己配置的检测液，下面是一些我自己的看法，希望有所帮助：
1.无色。
2、尽量立即测
3.我做的时候MDA工作液是自己配的而且是现配现用的，尽量配好母液，在测量之前配置，严格避光就不知道需不需要，是不是时间一长里面的成分反应了呢？
4、浓度的问题不好说，跟你的提取有很大关系，没有准确的剂量，一般来说只要浓度不是过低就不至于影响，即使浓度低了，也不会出现负值啊
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被迫的无知小小博
2楼2012-02-22 04:59:30
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zrn_jane

木虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by kidluag at 2012-02-22 04:59:30:
我做的MDA检测是自己配置的检测液，下面是一些我自己的看法，希望有所帮助：
1.无色。
2、尽量立即测
3.我做的时候MDA工作液是自己配的而且是现配现用的，尽量配好母液，在测量之前配置，严格避光就不知道需不 ...

你好，请问你用的是那个公司的试剂盒呢？我也是现用现配MDA工作液，不过碧云天的这个很难溶解，通常要70°C放置两三个小时呢，不知道有没有问题
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Theuniqueone
3楼2012-02-22 20:21:40
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生
引用回帖:
3楼: Originally posted by zrn_jane at 2012-02-22 20:21:40:
你好，请问你用的是那个公司的试剂盒呢？我也是现用现配MDA工作液，不过碧云天的这个很难溶解，通常要70°C放置两三个小时呢，不知道有没有问题

因为我的试验只属于小小的预实验，没有特意去定药品，用的都是实验室现成的药品，没有定专门的试剂盒，o(╯□╰)o，就是自己在药品柜里找的瓶装药品按照配方一点一点配出来的，而且是在两年前我硕士期间的事情了，具体不大记得了，不好意思。我是按照师姐给的配方配的，那时还不知道有试剂盒一说呢，帮不到忙不好意思
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被迫的无知小小博
4楼2012-02-22 23:59:15
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zrn_jane

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kidluag at 2012-02-22 23:59:15:
因为我的试验只属于小小的预实验，没有特意去定药品，用的都是实验室现成的药品，没有定专门的试剂盒，o(╯□╰)o，就是自己在药品柜里找的瓶装药品按照配方一点一点配出来的，而且是在两年前我硕士期间的事情了 ...

呵呵，还是谢谢热心的你啊。这么长时间了都没其他人回复。无奈啊......
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Theuniqueone
5楼2012-03-08 22:03:18
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CcNoel

铜虫 (小有名气)
大侠，我现在也是用碧云天的MDA试剂盒，我是做斑马鱼胚胎染毒后的MDA检测，但是目前愣是没看懂，我应该怎么处理斑马鱼胚胎呢？
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快点毕业
6楼2015-03-23 20:37:59
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自己的蝈蝈

新虫 (初入文坛)
请问，最后解决了吗？
我也用的碧云天的 可是   MDA测出来也是负值，SOD也是一样。  
都快崩溃了
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7楼2015-10-15 15:43:43
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maggie3277

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 自己的蝈蝈 at 2015-10-15 15:43:43
请问，最后解决了吗？
我也用的碧云天的 可是   MDA测出来也是负值，SOD也是一样。  
都快崩溃了

请问你后来测出MDA的值了吗？
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8楼2018-08-22 22:25:21
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