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zrn_jane

木虫 (小有名气)

[求助] 求助MDA测试相关细节

有过做MDA检测的个位大侠。我的实验组样品是由于氧化应激导致大量死亡,也用光学显微镜观察到了,但是已经做了4次MDA测试,样品孔的吸光度竟然总是负,比空的都低。之后检查试验的各个步骤,有几个细节想咨询一下?
1、MDA工作液配好后应该是无色还是粉色?(实验过程中遇到过粉色,本人认为应是无色)
2. 样品-80保存。是应当收集蛋白质之后立即测还是可以保存一段时间?不知道过程中会不会受影响
3. 是否在MDA工作液与蛋白样品混合之前的操作要严格避光?
4. 蛋白浓度大概要多大才差不多呢?之前有看到说蛋白浓度低会引起检测不到氧化应激。
PS: 我用的是碧云天的MDA试剂盒
望大家积极参与讨论。谢谢!
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Theuniqueone
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生

引用回帖:
3楼: Originally posted by zrn_jane at 2012-02-22 20:21:40:
你好,请问你用的是那个公司的试剂盒呢?我也是现用现配MDA工作液,不过碧云天的这个很难溶解,通常要70°C放置两三个小时呢,不知道有没有问题

因为我的试验只属于小小的预实验,没有特意去定药品,用的都是实验室现成的药品,没有定专门的试剂盒,o(╯□╰)o,就是自己在药品柜里找的瓶装药品按照配方一点一点配出来的,而且是在两年前我硕士期间的事情了,具体不大记得了,不好意思。我是按照师姐给的配方配的,那时还不知道有试剂盒一说呢,帮不到忙不好意思
被迫的无知小小博
4楼2012-02-22 23:59:15
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
zrn_jane(金币+3): 有帮助 谢谢参与 2012-02-22 20:20:04
我做的MDA检测是自己配置的检测液,下面是一些我自己的看法,希望有所帮助:
1.无色。
2、尽量立即测
3.我做的时候MDA工作液是自己配的而且是现配现用的,尽量配好母液,在测量之前配置,严格避光就不知道需不需要,是不是时间一长里面的成分反应了呢?
4、浓度的问题不好说,跟你的提取有很大关系,没有准确的剂量,一般来说只要浓度不是过低就不至于影响,即使浓度低了,也不会出现负值啊
被迫的无知小小博
2楼2012-02-22 04:59:30
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zrn_jane

木虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by kidluag at 2012-02-22 04:59:30:
我做的MDA检测是自己配置的检测液,下面是一些我自己的看法,希望有所帮助:
1.无色。
2、尽量立即测
3.我做的时候MDA工作液是自己配的而且是现配现用的,尽量配好母液,在测量之前配置,严格避光就不知道需不 ...

你好,请问你用的是那个公司的试剂盒呢?我也是现用现配MDA工作液,不过碧云天的这个很难溶解,通常要70°C放置两三个小时呢,不知道有没有问题
Theuniqueone
3楼2012-02-22 20:21:40
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zrn_jane

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kidluag at 2012-02-22 23:59:15:
因为我的试验只属于小小的预实验,没有特意去定药品,用的都是实验室现成的药品,没有定专门的试剂盒,o(╯□╰)o,就是自己在药品柜里找的瓶装药品按照配方一点一点配出来的,而且是在两年前我硕士期间的事情了 ...

呵呵,还是谢谢热心的你啊。这么长时间了都没其他人回复。无奈啊......
Theuniqueone
5楼2012-03-08 22:03:18
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