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diguoxueye

金虫 (正式写手)

[交流] 测定蔬菜的MDA遇到的问题已有2人参与

我在测定MDA值的过程中遇到了几个问题。
1.TBA的TCA溶液稳定性比较差。TBA很难溶于TCA,所以,我是加热溶解,结果溶液冷却后,有出现少量的悬浮物。
2.同一批次的蔬菜样品,都是采用100℃左右的温度加热15min(用电磁炉加热,所以,温度可能在100℃左右波动),采用同样的实验方法,结果测定的实验数据中450nm的吸光值远大于532nm以及600nm处的吸光值。并且,平行实验的结果的稳定性很差,有时候,平行实验的MDA含量都是正值,有时都是负值,有时候既有正值,又有负值,但是平行试验之间的差值很大,甚至不再一个数量级上。有没有什么办法可以提高532nm吸光值,减小450nm处吸光值?
3.我采用的是下面的计算公式
其中,V0测定液体积是指什么?
测定蔬菜的MDA遇到的问题
360软件小助手截图20140305114022.jpg
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mixi113

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1.溶解速度确实慢,一般我是提前半天到一天的时间配好,有少量悬浮物也算正常,我做的时候也这样。
2.当时我也采用的你这个实验方法,结果和你差不多,所以直接把这个指标废弃了。100℃水浴时,样品都能沸腾,最好还是温度低一些吧。师弟做的时候是改用80℃水浴,lz再查几篇文献查考一下吧。
3.V0就是你从VT中取出用来测定吸光度的提取液的体积。比如说,假设取10g鲜样提取定容至100mL,这100mL就是VT,提取液总体积;量取1.0mL提取液放入试管,再加入5.0mLTBA,反应后待测,那么这里所量取的1.0mL提取液就是V0。
世上无事,何须自扰
2楼2014-03-05 12:59:10
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mixi113

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by diguoxueye at 2014-06-12 11:13:10
你好。如果我采用以下方法呢?称取蔬菜样品3g,30mL 100g/L  TCA溶液,研磨,过滤。
再取4mL上清液(对照组:加4.0mL 100g/L TCA),加4.0mL0.67%TBA,混合后在沸水浴中20min,取出冷却,分别测定在450,532,600nm处 ...

还是第一个公式是对的。MDA的含量不可能很高的,毕竟它是膜脂过氧化作用的产物之一。
世上无事,何须自扰
5楼2014-06-12 21:02:46
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