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shelly9018

新虫 (小有名气)

[求助] 跑DGGE胶时,结果的好坏,那些事主要因素,缓冲液,电压,胶的配比等? 已有1人参与

(1)跑DGGE胶时,结果的好坏,那些是主要因素,缓冲液,电压,胶的配比,凝胶时候的室温,上样量,时间,胶板是否干净等,这些因素中那些又是无关紧要的呢;
(2)我有时候觉得如果配胶时室温太低,好像凝出来的胶很脆,而且跑出来的结果也不好;
(3)上样量太多会不会影响结果,如果跑出来胶背景太白,条带不清醒,主要是什么因素引起的,我猜想是不是跑胶的时间;
(4)染色的时间长短会不会也会引起这个问题。
(5)配好的缓冲液,和其他的试剂要不要灭菌哦,有人说缓冲液放久了会长霉菌,会影响结果,是不是每次跑都要更换啊。
说了那么多问题,就是希望各位虫友能够多多给出建议,让我抓住主要矛盾,跑胶跑了那么久,结果都不好,主要是背景白,条带不是很清楚,模糊不好区分,心情特别沮丧
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+3, 鼓励热心应助 2014-02-25 20:42:08
shelly9018: 金币+5, 有帮助 2014-02-25 21:55:26
看到这个问题突然想到自己以前看过的一篇文章,见附件,希望对你有用

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  • 附件 1 : 应用DGGE研究微生物群落时的常见问题分析.pdf
  • 2014-02-25 19:59:13, 597.54 K
但行好事,莫问前程
2楼2014-02-25 19:58:53
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shelly9018

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 20093651 at 2014-02-25 19:58:53
看到这个问题突然想到自己以前看过的一篇文章,见附件,希望对你有用

谢谢
3楼2014-02-25 21:55:30
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shelly9018

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 20093651 at 2014-02-25 19:58:53
看到这个问题突然想到自己以前看过的一篇文章,见附件,希望对你有用

分析的还是挺全面的,让我从理论上认识更深了,但是对于实际做实验还是太理论了,不知道有没有更直接的经验可以交流
4楼2014-02-25 21:57:09
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shelly9018 at 2014-02-25 21:57:09
分析的还是挺全面的,让我从理论上认识更深了,但是对于实际做实验还是太理论了,不知道有没有更直接的经验可以交流...

站内联系吧
但行好事,莫问前程
5楼2014-02-25 22:05:02
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clmlff

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shelly9018 at 2014-02-25 21:57:09
分析的还是挺全面的,让我从理论上认识更深了,但是对于实际做实验还是太理论了,不知道有没有更直接的经验可以交流...

您好,最近我跑DGGE胶也遇到同样的问题,跑了两三次,背景还是很糊,分不清条带的感觉,不知你最终是如何解决这个问题的。谢谢!
6楼2015-11-08 14:30:30
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二月smile

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 20093651 at 2014-02-25 19:58:53
看到这个问题突然想到自己以前看过的一篇文章,见附件,希望对你有用

你好,能把这个附件分享给我吗?现在下不了。谢谢!
7楼2016-05-02 21:30:56
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