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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 胞内酶 胞外酶鉴定
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红魔曼联

金虫 (正式写手)

[求助] 胞内酶 胞外酶鉴定 已有1人参与

如果分理出一株产酶菌，怎么鉴定产的该酶是胞内酶还是胞外酶呢？
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1楼 2014-02-25 11:44:00
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励热心应助 2014-02-25 15:18:28
红魔曼联: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-07-30 10:09:02
跑2个电泳就知道了。
一个发酵周期做完后，将发酵液离心得上清，进行SDS-PAGE；
同时将离心后的细胞，加缓冲液进行破碎，离心，上清液进行SDS-PAGE。

看你的目标条带是否出现。在上清液的PAGE胶中就是胞外酶；破碎后的PAGE胶中出现就是胞内酶。

值得注意的是，若是胞内酶，整个泳道都会有大小不一的条带，需要你的表达量达到一定量，才能在SDS-PAGE中看出来。

若你的表达量较低，或者仍不能确定，将上述2块PAGE胶进行western试验，就可以确定你的酶时胞外还是胞内了。
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2楼2014-02-25 14:51:06
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