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红魔曼联金虫 (正式写手)
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胞内酶 胞外酶鉴定 已有1人参与
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| 如果分理出一株产酶菌，怎么鉴定产的该酶是胞内酶还是胞外酶呢？ |
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reallpf
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励热心应助 2014-02-25 15:18:28
红魔曼联: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-07-30 10:09:02
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跑2个电泳就知道了。 一个发酵周期做完后，将发酵液离心得上清，进行SDS-PAGE； 同时将离心后的细胞，加缓冲液进行破碎，离心，上清液进行SDS-PAGE。 看你的目标条带是否出现。在上清液的PAGE胶中就是胞外酶；破碎后的PAGE胶中出现就是胞内酶。 值得注意的是，若是胞内酶，整个泳道都会有大小不一的条带，需要你的表达量达到一定量，才能在SDS-PAGE中看出来。 若你的表达量较低，或者仍不能确定，将上述2块PAGE胶进行western试验，就可以确定你的酶时胞外还是胞内了。 |
2楼2014-02-25 14:51:06