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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 免疫染色的细胞爬片总是脱落
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

[求助] 免疫染色的细胞爬片总是脱落 已有2人参与

各位亲，使用chamber silde准备细胞爬片时遇到如下问题：
       细胞悬液加入后(-2 day)，培养两天至细胞融合，开始诱导实验（0 day）。但是，对照组（增殖培养基）的细胞总容易在4-5 day 时出现脱落现象，诱导组细胞还不错。
    目前，已经尝试提高细胞密度, 降低细胞密度，使用胶原蛋白包被的chamber silde等方法，但是，效果都不太好。

希望各位亲提供一些指导意见！！

P.S 本人培养的是脂肪细胞
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因为喜欢，所以担忧，所以后退
1楼 2014-01-29 11:28:50
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by treetreew at 2014-02-12 14:12:35
满了肯定漂，老了就会趴。。。。。
时间比较久的话还是留出提前量吧，譬如4well的chamber我就种10E4个细胞
这种小圆片爬片或者chamberslide的我都会铺fn/ln，至少结果我都可以接受
collagen 我自己很少用，我们实 ...

一直都是用的Chamber slide。
Fibronectin包被的Chamber培养效果比Collagen I 的要好，是啊？那我试试看。不过，Fibronectin包被的Chamber在无血清培养方面，好像没有collagen 的好
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因为喜欢，所以担忧，所以后退
7楼2014-02-12 17:37:12
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sea03831

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-11 15:20:35
是营养耗尽导致细胞脱落吗？建议中间更换一次培养基，试试。
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2楼2014-02-09 22:29:13
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sea03831 at 2014-02-09 22:29:13
是营养耗尽导致细胞脱落吗？建议中间更换一次培养基，试试。

不是的，一直都是换液的，但还是会脱落。后来，尝试不换液，半换液也还是一样脱落。
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3楼2014-02-10 17:21:38
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treetreew

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-11 15:20:39
chamber是容易掉，盖玻片好像还好一点，包fn/ln能好一些
或者换小圆片爬片，半斤八两都是。。。。我用小圆片的时候多，也要事先包fn/ln
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4楼2014-02-11 09:06:29
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