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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

[求助] 免疫染色的细胞爬片总是脱落 已有2人参与

各位亲,使用chamber silde准备细胞爬片时遇到如下问题:
       细胞悬液加入后(-2 day),培养两天至细胞融合,开始诱导实验(0 day)。但是,对照组(增殖培养基)的细胞总容易在4-5 day 时出现脱落现象,诱导组细胞还不错。
    目前,已经尝试提高细胞密度, 降低细胞密度,使用胶原蛋白包被的chamber silde等方法,但是,效果都不太好。

希望各位亲提供一些指导意见!!

P.S 本人培养的是脂肪细胞
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by treetreew at 2014-02-11 09:06:29
chamber是容易掉,盖玻片好像还好一点,包fn/ln能好一些
或者换小圆片爬片,半斤八两都是。。。。我用小圆片的时候多,也要事先包fn/ln

用了collagen I 的chamber 还是会脱落,有人说细胞增殖过快或者细胞太老了也会导致细胞容易卷边,脱落。不知道是不是这个原因。
因为喜欢,所以担忧,所以后退
5楼2014-02-11 17:03:13
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sea03831

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-11 15:20:35
是营养耗尽导致细胞脱落吗?建议中间更换一次培养基,试试。
2楼2014-02-09 22:29:13
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bjgymilyxz

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sea03831 at 2014-02-09 22:29:13
是营养耗尽导致细胞脱落吗?建议中间更换一次培养基,试试。

不是的,一直都是换液的,但还是会脱落。后来,尝试不换液,半换液也还是一样脱落。
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3楼2014-02-10 17:21:38
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treetreew

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-11 15:20:39
chamber是容易掉,盖玻片好像还好一点,包fn/ln能好一些
或者换小圆片爬片,半斤八两都是。。。。我用小圆片的时候多,也要事先包fn/ln
4楼2014-02-11 09:06:29
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