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花街小小

新虫 (初入文坛)

[求助] 分光光度计参比、空白参比的问题。 已有4人参与

我们分光光度计是那种放两个比色皿，一个一直不动作为参比，另一个用来测水样。
我测TN\TP的时候，都是用纯水较零，然后测空白样、水样、最后结果用水样减去空白样。
现在测叶绿素A，我还是先用纯水较零，然后测90%丙酮（也就是空白样），水样，最后用水样减去空白样。但是别人告诉我不应该这样。应该直接用90%丙酮较零，然后读取各水样就是应得的值。
我现在很疑惑，到底哪种正确，如果是直接用90%丙酮较零，为什么TN\TP不能直接用空白样较零呢？
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1楼 2014-01-23 00:13:03
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花街小小

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 下一页、空白 at 2014-01-23 09:31:13
应该是这样的，你用纯水做参比就用纯水校零，用空白样做参比就用空白样校零，试验步骤是你把参比样放进去以后再按校零按键，这样出来的数据就是你的水样的数据，按你的操作做的话试验误差还是蛮大的，因为分光光度数 ...

我现在有点混乱，就说测TN吧，做标线的时候，我用纯水参比调零，得到标液浓度从0到8的不同的吸光度值，然后我就用这些值画标线，是一条没经过原点的线即标线。
之后我测水样的时候也用纯水做的参比调零，然后测得空白样和各个水样的吸光度。之后我把吸光度带入那条标线得到各个浓度，最后用各水样浓度减去空白样浓度就得到我测得的值。
我感觉这样好像不太对啊？请高手继续指点啊！
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3楼2014-01-23 15:00:43
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下一页、空白

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
花街小小: 金币+2, ★有帮助, 谢谢啊 2014-01-23 15:00:58
stormxuhao: 金币+2, 积极回复 2014-01-24 11:44:06
应该是这样的，你用纯水做参比就用纯水校零，用空白样做参比就用空白样校零，试验步骤是你把参比样放进去以后再按校零按键，这样出来的数据就是你的水样的数据，按你的操作做的话试验误差还是蛮大的，因为分光光度数据本来就很精确，每次测量都要校零，我一直在用分光光度法做标准曲线，发现用纯水做参比做出来的方程测水样也用纯水做参比得出的结果和用空白样做出来的方程测水样的时候也是用空白样得出来的结果差别不大，所以你只要测量的时候统一就行了，个人觉得空白样太麻烦。
还要提醒你的就是用分光光度做实验就算同一个水样也测不出同样的值来，还是多次测量求平均值得好。希望能帮到你。
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2楼2014-01-23 09:31:13
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金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 花街小小 at 2014-01-23 15:00:43
我现在有点混乱，就说测TN吧，做标线的时候，我用纯水参比调零，得到标液浓度从0到8的不同的吸光度值，然后我就用这些值画标线，是一条没经过原点的线即标线。
之后我测水样的时候也用纯水做的参比调零，然后测得 ...

“之后我把吸光度带入那条标线得到各个浓度，最后用各水样浓度减去空白样浓度就得到我测得的值。”不是标准曲线得到的方程么？还有就是为什么要减去空白样？你是想规避加的试剂的影响么？
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4楼2014-01-24 10:13:18
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花街小小

新虫 (初入文坛)
★
vaughn: 金币+1, 耐心解释 2014-01-29 23:18:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by 下一页、空白 at 2014-01-24 10:13:18
“之后我把吸光度带入那条标线得到各个浓度，最后用各水样浓度减去空白样浓度就得到我测得的值。”不是标准曲线得到的方程么？还有就是为什么要减去空白样？你是想规避加的试剂的影响么？...

就是带入标曲那个方程。
因为做标曲的时候0浓度（即空白样），和平时测水样的时候的空白样的吸光度肯定有误差，因为一些人为或试剂的原因，所以我认为要减空白样来消除误差。
每次实验不是都默认要做空白样吗，如果不减的话空白样不是就用不上了吗？
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5楼2014-01-24 18:11:53
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