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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急！！求助primer5使用问题
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菜菜0929

木虫 (小有名气)

[交流] 急！！求助primer5使用问题

请问1、输入primer5的序列必须是5‘到3’还是3‘到5’？
       2、设计引物时，*G的要求是什么？
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1楼2014-01-17 18:16:20
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 菜菜0929 at 2014-01-19 21:29:30
嗯，^G值有什么要求，上下引物要差不多？差的多影响大吗？
...

我师姐设计引物一般只看GC%，退火温度，发夹结构，引物二聚体，错配，长度这几方面。
赞一下 回复此楼
5楼2014-01-20 08:51:11
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-21 09:29:34
输入primer5的序列没有很严格的要求，只要能设计出来就行。
设计引物时，C  G的要求是40%-60%。但是实在多了超过60%也没事。
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3楼2014-01-18 11:34:05
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菜菜0929

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-01-18 11:34:05
输入primer5的序列没有很严格的要求，只要能设计出来就行。
设计引物时，C  G的要求是40%-60%。但是实在多了超过60%也没事。

嗯，^G值有什么要求，上下引物要差不多？差的多影响大吗？

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4楼2014-01-19 21:29:30
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菜菜0929

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-01-20 08:51:11
我师姐设计引物一般只看GC%，退火温度，发夹结构，引物二聚体，错配，长度这几方面。...

(⊙o⊙)哦，谢谢

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6楼2014-01-20 18:31:54
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