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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 求助，液液萃取血样，现回收率约35%，该怎么改进呢？
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)

[求助] 求助，液液萃取血样，现回收率约35%，该怎么改进呢？ 已有3人参与

样品极性大，试验用乙酯和正丁醇萃取血样。
乙酯回收率为，样品37%，内标35%（样品为黄酮类，内标为槲皮素）。正丁醇萃取，样品70%，内标22%。
是不是乙酯回收率太低，而正丁醇的样品和内标回收率差太多呢？
下一步想用混合溶剂试试，暂定乙酯与正丁醇10:1，请问这样合适吗？如不合适，该用什么溶剂呢?
求大神指点啊！！！
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1楼 2014-01-07 10:00:08
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rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
踮起脚尖2012: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:11:49
黄酮类有酚羟基或者羧基，槲皮素也有酚羟基，显一定酸性。
你可以试试在血浆里面加酸，看看能不能增加提取回收率。
酸的量和浓度根据你血浆用量来。
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坚持
2楼2014-01-07 15:32:54
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
踮起脚尖2012: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:11:57
如果70%的回收满意的话，可以考虑换个内标
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3楼2014-01-07 16:08:03
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-01-07 16:08:03
如果70%的回收满意的话，可以考虑换个内标

可以考虑，就是找个内标很难的啊？
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4楼2014-01-07 17:34:24
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rosegarden at 2014-01-07 15:32:54
黄酮类有酚羟基或者羧基，槲皮素也有酚羟基，显一定酸性。
你可以试试在血浆里面加酸，看看能不能增加提取回收率。
酸的量和浓度根据你血浆用量来。

样品遇酸会变性，所以尽量不加酸，还有更好的方法吗？
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5楼2014-01-07 17:35:58
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-01-07 16:08:03
如果70%的回收满意的话，可以考虑换个内标

还有就是，正丁醇回收率不错但很难吹干，我的样品加热又容易改变
有没有什么溶剂可替换正丁醇呢？
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6楼2014-01-07 17:46:49
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rosegarden

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 踮起脚尖2012 at 2014-01-07 17:35:58
样品遇酸会变性，所以尽量不加酸，还有更好的方法吗？...

是什么原因不用蛋白沉淀啊？
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坚持
7楼2014-01-07 19:02:04
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by rosegarden at 2014-01-07 19:02:04
是什么原因不用蛋白沉淀啊？...

做了一次直接沉淀蛋白，回收率很低，不知道什么原因，所以试了试别的。
打算再做一次看看是不是还是很低，要是还很低就只能放弃了
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8楼2014-01-08 08:30:51
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rosegarden

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 踮起脚尖2012 at 2014-01-08 08:30:51
做了一次直接沉淀蛋白，回收率很低，不知道什么原因，所以试了试别的。
打算再做一次看看是不是还是很低，要是还很低就只能放弃了...

你用液相做的吗
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坚持
9楼2014-01-08 11:09:17
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by rosegarden at 2014-01-08 11:09:17
你用液相做的吗...

是的
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10楼2014-01-09 12:32:48
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