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huihui2255365

金虫 (小有名气)

[求助] 请教个梯度洗脱问题 已有2人参与

我想分离检测没食子酸和芦丁,流动相甲醇:0.1%磷酸=28:72,没食子酸峰有点钝,但是还能说得过去,芦丁40:60峰形很好,但是混在一起我设置了几个梯度都做不出来,因为甲醇和没食子酸出峰接近,分不开,

不知道有没有熟悉液相或者超高的牛人给指点下,谢谢啦!
ps:比较倾向于这个流动相,因为还要分其他物质
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huihui2255365: 金币+5 2014-01-02 14:41:20
梯度洗脱可以在15~20左右为起始浓度,不知道28:72的流动相没食子酸保留如何,是否与甲醇分离。
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2014-01-02 09:45:48
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huihui2255365

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by akosrios at 2014-01-02 09:45:48
梯度洗脱可以在15~20左右为起始浓度,不知道28:72的流动相没食子酸保留如何,是否与甲醇分离。

没食子酸单独在甲醇:0.5%磷酸=15:85的时候有很好的分离,我走甲醇:0.1%磷酸的时候峰不好,然后走到28:72的时候峰不钝了,但是甲醇又干扰了
3楼2014-01-02 10:19:27
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huihui2255365 at 2014-01-02 10:19:27
没食子酸单独在甲醇:0.5%磷酸=15:85的时候有很好的分离,我走甲醇:0.1%磷酸的时候峰不好,然后走到28:72的时候峰不钝了,但是甲醇又干扰了...

甲醇应该是没保留,死体积就流出了;你说的可能是梯度峰,用高纯度水试剂,换默克的甲醇试试。
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
4楼2014-01-02 11:42:36
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huihui2255365

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by akosrios at 2014-01-02 11:42:36
甲醇应该是没保留,死体积就流出了;你说的可能是梯度峰,用高纯度水试剂,换默克的甲醇试试。...

谢谢!!
5楼2014-01-02 14:41:00
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
huihui2255365: 金币+1, 有帮助 2014-03-19 21:51:42
甲醇作为流动相不可能保留出峰,梯度尽量改变慢些,这样梯度峰会有较小干扰
6楼2014-01-02 21:06:22
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