| 查看: 3245 | 回复: 30 | ||||
[求助]
唯一碳源实验 已有11人参与
|
||||
|
本人最近在做一个海洋细菌是否能利用一种特殊的有机物作为唯一碳源的实验，基础培养基用的是MAMS（成分只包括一些常见的无机盐和维生素母液和微量元素母液，我看了又看这里面中唯一可能出问题的就是维生素了，但查了文献资料他们在做这个实验的时候确实也加入了维生素，而且我的知识告诉俺维生素无法作为生物体的碳源为其提供能量，只是有起一些生长因子的辅酶辅基的作用，所以我就毅然决然的加了） 我的实验组是在基础培养基中加入了我的目的碳源，而阴性对照组没有加任何碳源只有基础培养基（固体平板（2%琼脂）和液体都做了，所以应该不是琼脂的问题），结果这两个里面的细菌的生长情况竟然几乎是一样一样的，才培养了12个小时而已都能看到明显的生长，于是乎俺就纳闷了，在没有碳源的阴性对照组中细菌是怎么生长起来的，而且生长情况竟然跟实验组旗鼓相当？（所有的使用的器皿都用三蒸水仔细刷过，灭菌锅里面的水灭菌前都用一蒸水换了两遍） 我猜想的可能的原因可能是，不知道对不对： 1、药品除了氯化钠之外我用的都不是新开封的，可能会有有机物污染（但是我又想了想这个量应该很小，细菌用这么一点有机物也不能长这么快吧） 2、我在接种到这个唯一碳源培养基的时候是从完全培养基上面刮取的菌落，并没有洗涤菌体（这步我也不知道是不是必须的，做的时候忘记考虑这一点了），会不会菌体从培养基中带下来了微量的碳有机物，或者是细菌用的根本就是自身体的有机物生长的（如果是这样也应该看不到有明显的生长吧，不能自己利用自己的东西，自身的体积和数量还会变大吧）？ 向各位大虾求助啊，望有经验的你能抽出几分钟的时间不吝赐教，万分感激！ 我这个实验除了应该加一步洗涤菌体和使用新开封的药品之外还应该做怎样改进，哪个地方是有错误的么（是否应该加入维生素）？有没有谁知道能否从试剂公司直接买到不含有机物的专门做唯一碳源实验的基础培养基呢？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 只是感兴趣 |
» 猜你喜欢
垃圾破二本职称评审标准
已经有18人回复
-
职称评审没过，求安慰
已经有53人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有5人回复
-
26申博自荐
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 唯一碳源的培养基染的是杂菌？
已经有22人回复
- 枯草芽饱杆菌碳源优化问题
已经有5人回复
- 木醋杆菌氮源选择
已经有4人回复
- 设计一个微生物实验
已经有5人回复
- 从环境中直接分离细菌的常规途径有哪些？
已经有7人回复
- 求问一下污水处理厂活性污泥的菌群种类
已经有17人回复
- 求助:做碳14的实验对身体到底有多大影响
已经有5人回复
- 求助：请设计实验证明某一有机物是某个微生物的生长的特定能源？
已经有13人回复
- 酵母菌碳源同化实验的基础培养基问题
已经有11人回复
- 乙酸钠作为碳源时，PH为什么会升高？
已经有8人回复
- 生物素 biotin的浓度是否会影响菌体的生长？
已经有8人回复
- 浓度梯度设置和OD值对应菌液浓度的问题
已经有3人回复
- 微生物降解多环芳烃实验中的诡异现象
已经有15人回复
- 枯草芽孢杆菌用蛋白胨做氮源
已经有8人回复
- EPS 非丝状菌 生物泡沫
已经有15人回复
- 纤维素酶高产菌株筛选时的透明圈问题
已经有22人回复
- 酿酒酵母基因敲除实验顺利需多少时间
已经有22人回复
- 平板划线分离纯化遇到的问题
已经有3人回复
- 糖发酵试验结果不产酸，就表明该菌不能利用该糖吗？
已经有7人回复
- 枯草芽孢杆菌能不能以葡萄糖酸钠为唯一碳源生长
已经有3人回复
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 回帖置顶 2013-12-22 23:12:10
Leo要努力啊(amisking代发): 金币+1, 感谢发帖应助，帮助虫子 2013-12-22 23:12:17
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 回帖置顶 2013-12-22 23:12:10
Leo要努力啊(amisking代发): 金币+1, 感谢发帖应助，帮助虫子 2013-12-22 23:12:17
|
若是排除上述两个原因，LZ可以尝试再加两组对照试验， 1. 加唯一碳源不加维生素。 2. 既不加碳源也不加维生素 另外，虽然大多细菌是不能利用琼脂的，但少量的细菌也是可以利用的，不过按照LZ所说液体与固体的情况一样，应该也不是琼脂的问题。 若是怀疑是利用自身有机物的话，LZ可以测测菌体干重，对比下。 再者就是延长培养时间，看看最终的生长情况。 |
6楼2013-12-21 16:17:36
luwei13566
木虫 (正式写手)
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4334.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 感谢发帖应助，帮助虫子 2013-12-22 23:12:06
amisking: 回帖置顶 2013-12-22 23:12:07
Leo要努力啊: 金币+9, ★有帮助, 第一个帮助的人 谢谢啦 2013-12-24 20:29:24
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 感谢发帖应助，帮助虫子 2013-12-22 23:12:06
amisking: 回帖置顶 2013-12-22 23:12:07
Leo要努力啊: 金币+9, ★有帮助, 第一个帮助的人 谢谢啦 2013-12-24 20:29:24
|
1.确实可能存在试剂存在有机物的情况，特别是琼脂，而且你配培养基用的水可能也含有有机质。 2.你说你接种的时候是从完全培养基上刮取的菌落，这个不可避免将会引入有机质。而且你是怎么接种的，划线？其实你可以试试用10ul的小枪头轻轻沾一点完全培养基上的菌落，不用挑多，也别碰到培养基了，然后把枪头在少量（具体加多少自己确定）的灭菌水（最好是蒸馏水）里涮几下，等于是做了个很低浓度的菌悬液。之后涂平板。涂一个阴性对照，涂一个特殊碳源的，还可以涂一个完全培养基的平板做一个阳性对照，如果你对你的琼脂不放心也可以涂一个只含琼脂的平板。当然也可以按你说的洗涤一下菌体，然后划线~~ |
4楼2013-12-21 01:15:08
9楼2013-12-21 22:34:38
2楼2013-12-20 21:51:38
战斗节能
金虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1069.3
- 红花: 2
- 帖子: 92
- 在线: 30小时
- 虫号: 2870889
- 注册: 2013-12-14
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2013-12-20 22:38:43
5楼2013-12-21 07:56:01
caisanrenju
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2054.5
- 散金: 239
- 红花: 2
- 帖子: 411
- 在线: 129.1小时
- 虫号: 1263848
- 注册: 2011-04-13
- 专业: 食品科学基础
7楼2013-12-21 16:55:04
8楼2013-12-21 22:24:51
10楼2013-12-21 22:36:33